Ein kyro-elektronenmikroskopischer Ansatz zur Identifizierung der molekularen Struktur der nativen Schlitzmembran

一种冷冻电子显微镜方法来识别天然狭缝膜的分子结构

• 批准号: 168622626
• 负责人: Professor Dr. Achilleas Frangakis
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biophysik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2009-12-31 至 2013-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/168622626?language=en
• 关键词: Ein; kyro; elektronenmikroskopischer; Ansatz; zur

Podozytenschädigungen gehen praktisch immer mit einer Proteinurie einher und sind eine häufige Ursache einer Glomerulosklerose, einer fortschreitenden Niereninsuffizienz und einer Dialysepflichtigkeit. Podozyten bilden einen hochkomplexen dreidimensionalen Epithelverband, der durch zahlreiche podozytäre Zellausläufer (Fußfortsätze) und dazwischen befindliche Filtrationsschlitze gekennzeichnet ist. Die Filtrationsschlitze werden durch einzigartige Zell-Zellverbindungen (Schlitzmembranen) überbrückt. In den letzten 10 Jahren ist unser Verständnis der molekularen Struktur der Schlitzmembran durch die Identifikation von Nephrin erheblich präzisiert worden. Wir und andere Gruppen konnten zeigen, dass die Schlitzmembran Ausgangspunkt dynamischer Signalkaskaden ist und somit wesentlich zu einer funktionellen Aufrechterhaltung des Filterapparates beiträgt (Antragsteller Huber). Allerdings ist trotz der Identifikation von einzelnen Schlitzmembrankomponenten und ihrer Signalwege bis heute kaum etwas über die ultrastrukturelle Komposition der Schlitzmembran und ihrer komplexen molekularen Umbauprozesse während glomerulärer Erkrankungen bekannt. Die Morphologie podozytärer Zell-Zell-Kontakte ähnelt Cadherin-basierten Zellkontaktstrukturen, die von uns kürzlich erstmals auf molekularer Ebene mittels Kryo-Elektronenmikroskopie aufgelöst werden konnten (Antragsteller Frangakis). Unserer Vorergebnisse zeigen, dass die Schlitzmembran ebenfalls ideal für eine kryo-elektronenmikroskopische Analyse geeignet ist. Ziel unseres Projektes ist es daher, durch die Kombination von ausgewählten transgenen Mausmodellen mit modernsten hochauflösenden kryo-elektronenmikroskopischen Aufnahmen erstmals die molekulare Struktur der Schlitzmembran unter physiologischen und pathophysiologischen Bedingungen aufzulösen. Damit soll dieses Projekt die einzigartige Erstellung eines molekularen Atlas der Schlitzmembran ermöglichen, mit welchem die strukturellen Veränderungen während glomerulärer Erkrankungen zugeordnet werden können.

Podozytenschädigungen gehen praktisch immer mit einer Proteinurie einher and sind eine häufige Ursache einer Glomerulosklerose，einer fortschreitenden Niereninsuffizienz and einer Dialysepflichtigkeit. Podozyten bilden einen hochkomplexen dreidimensionalen Epithelverband，der durch zahlreiche podozytäre Zellausläufer（Fußfortsätze）und dazwischen befindliche Filtrationsschlitze gekennzeichnet ist.过滤器韦尔登通过einzigartige Zell-Zellverbindungen（Schlitzmembrane）überbrückt。近10年来，通过对肾细胞的早期沃登的鉴别，我们对肾细胞的分子结构进行了研究。我们和我们的团队知道，Schlitzmembran Ausgangspunkt dynamischer Signalkaskaden is and somit wesentlich zu einer funktionellen Aufrechterhaltung des Filterapartates beiträgt（Antragsteller Huber）。Allerdings is trotz der Identifikation von einzelnen Schlitzmembrankomponenten und irrer Signalwege bis heute kaum etwas über die ultrusturelle Composition der Schlitzmembran und irrer komplexen molekularen Umbauprozesse während glomerulärer Erkrankungen bekannt. Zell-Zell-Kontakte podozytärer Zell-Zell-Kontakte ähnelt Cadherin-baseden Zellkontaktstrukturen，die von uns kürzlich estmals auf molekularer Ebene mittels Kryo-Elektronenmikroskopie aufgelöst aufgelöst韦尔登（Antragsteller Frangakis）. Unserer Vorergebnisse zeigen，dass die Schlitzmembran ebenfalls ideal für eine kryo-elektronenmikroskopische Analyse geignet ist.我们的研究项目是非常重要的，通过将具有现代化高通量冷冻电子显微镜的转基因动物模型结合起来，我们可以在生理和病理生理学层面上获得Schlitzmembran的分子结构。Damit soll dieses Projekt die einzigartige Erstellung eines molekularen Atlas der Schlitzmembran ermöglichen，mit welchem die strukturellen Veränderungen während glomerulärer Erkrankungen zugordnet韦尔登können.