Konzipierung, Aufbau und Charakterisierung eines integrierten mikrofluidischen Systems für die in vitro-Immunzellaktivierung und Untersuchung der immunoregulierenden Funktion von Milch

用于体外免疫细胞激活和牛奶免疫调节功能研究的集成微流体系统的设计、构建和表征

• 批准号: 206782403
• 负责人: Privatdozentin Dr.-Ing. Christine Ruffert
• 金额: --
• 依托单位: Laboratory of Microsystems LMIS2
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2010-12-31 至 2011-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/206782403?language=en
• 关键词: Konzipierung; Aufbau; und; Charakterisierung; eines

Das Projektziel ist die Identifizierung gesundheitsfördernder Bestandteile von Milch mittels mikrofluidischer Analysemethoden. Ein längerfristiges Ziel ist die Entwicklung von Milchprodukten mit gesundheitsfördernden Eigenschaften. Konkret soll in der geplanten Studie ein In-vitro-System zur Untersuchung der entzündlichen Reaktion von Monozyten-Zellen (THP-1) auf Lipopolysaccharid (LPS) und Milch entwickelt werden, ihre Reaktion mit der von Monozyten-Makrophagen verglichen und die Sekretion dreier verschiedener Zytokine (TNF-α, IL-1b, IL-6) quantifiziert werden. Dazu ist ein integriertes Mikrofluidiksystem zu entwickeln, das aus vier funktionellen Einheiten besteht und die Ausführung vierer aufeinander folgender Schritte in einem einzigen Kanal erlaubt: (1) Zellwachstum und Stimulation, (2) Inkubation von Zytokin-Magnetkügelchen und mischen mit den Zellen in einer Inkubations-/“Brutkammer“, (3) Waschen der Zytokin-Magnetkügelchen und (4) die Zytokin-Quantifizierung.Ein Grundelement des mikrofluidischen Systems besteht aus zwei identischen Einheiten für die parallele Untersuchung der Reaktion der Monozyten und der Monozyten-Makrophagen-Stimulation mit LPS bzw. Milch. In jeder Einheit werden die Monozyten in einer eigenen Inkubationskammer kultiviert. Nach der induzierten Differenzierung der Monozyten zu Makrophagen in der ersten Kammer und der Monoschichtausbildung werden beide Kammern mit LPS oder vorverdauter Milch behandelt. Die Monozyten in der zweiten Kammer verbleiben in undifferenzierter Form in der Suspension. Eine Suspension mit funktionalisierten Magnetkügelchen wird in die Inkubationskammer transportiert, wo die freigesetzten Zytokine aus Monozyten und Monozyten-Makrophagen eingeleitet werden. Dann wird der Komplex aus Magnetkügelchen und Zytokinen „magnetisch gewaschen“, um ungebundene Proteine zu entfernen. Die Magnetkugel-Zytokin-Komplexe werden schließlich in der Detektionskammer magnetisch gefangen und mittels Fluoreszenzmikroskopie erfasst.

Das Projektastroist die Identifizierung gesundheitsfördernder Bestandteile von Milch mittels mikrofluorescer Analysemethoden. Ein längerfristiges Ziel ist die Entwicklung von Milchprodukten mit gesundheitsfördernden Eigenschaften.本文介绍了一种体外研究THP-1与脂多糖（LPS）和乳汁转化反应的方法，该方法通过检测THP-1与脂多糖和乳汁转化的反应，并对三种不同的促细胞因子（TNF-α、IL-1b、IL-6）进行定量测定。大足是一个完整的微流体系统，它具有最好的功能，并在一个卡纳尔运河中提供最好的辅助功能：（1）Zellwachstum und Stimulation，（2）Inkubation von Zytokin-Magnetkügelchen und mischen mit den Zellen in einer Inkubations-/“Brutkammer”，（3）Waschen der Zytokin-Magnetkügelchen und（4）die Zytokin-定量化.两种微流控系统的识别方法对单分子生物反应和单分子生物反应的平行研究Monozyten-Makrophagen-用LPS bzw刺激。米尔奇在一个单一的韦尔登行业中，印刷品是一种独特的印刷品。在前乳和后乳中分别用LPS或前乳培养韦尔登，以确定单抗的工业差异。第二种形式的单分子化合物在悬浮液中以无差别的形式出现。一种具有功能性的磁性悬浮液将用于油墨的运输，并将由Monozyten和Monozyten-Makrophagen韦尔登产生的游离Zytokine。然后将由Magnetkügelchen和Zytokinen“magnetisch gewaschen”组成的复合物，用于分离蛋白质。磁-发酵复合物韦尔登在磁性检测中起着重要的作用。