Reifung, Aktivität und Struktur der Cystein Peptidase Tan aus Drosophila

果蝇半胱氨酸肽酶 Tan 的成熟、活性和结构

基本信息

项目摘要

Drosophila Photorezeptorzellen schütten in Abhängigkeit von der Intensität des eingestrahlten Lichts in tonischer Form den Neurotransmitters Histamin aus, der die postsynaptischen großen monopolaren Zellen (LMC) durch Öffnung von Histamin gesteuerten Chloridkanälen hyperpolarisiert. Als Reaktion auf reduzierte Lichtintensität muss ein wirksames System der Neurotransmitter Inaktivierung und Entfernung aus dem synaptischen Spalt vorliegen. Wir haben dazu eine Modellvorstellung entwickelt, die Grundlage unserer Untersuchungen ist: Histamin wird aus dem synaptischen Spalt in die angrenzende Glia transportiert und dort durch das Ebony-Protein mit ß-Alanin zu N-ß-AIanyl-Histamin (Carcinin) umgewandelt. Nach Transport des Carcinins in die Photorezeptorzellen hydrolysiert das Tan-Protein das Konjugat wieder in die Ausgangsbestandteile ß-Alanin und Histamin. Histamin wird in Vesikel verpackt und ß-Alanin wird in die Glia zurücktransportiert. Als weiteren Nachweis für die Existenz dieses vollkommen neuen Neurotransmitterkreislaufs nach der Charakterisierung und Lokalisierung des Ebony Proteins, wollen wir die zelluläre und subzelluläre Expression von Tan in den Photorezeptoren mit Hilfe von Anti- Tan-Peptid Antikörpern bestimmen. Wir wollen die biochemischen Aktivitäten von Tan bestimmen. Insbesondere interessiert es uns, ob die Sequenzhomologie von Tan mit dem P. chrysogenum Enzym, Isopenicillin-N N-Acyltransferase, sich auch in entsprechenden Eigenschaften der Amidohydrolase und Acyltransferase Aktivität sowie einem autoproteolytischen Reifungsprozess wiederspiegelt. Hinweise auf die Bedeutung der nachgewiesenen Aktivitäten für das Sehvermögen wollen wir durch gezielte Mutagenese erhalten.
果蝇在突触后大单极泽伦(LMC)的神经递质组胺(Histamin)的增强形式中,通过对组胺的超极化作用,吸收单一光强度。所有降低光强度的反应都需要一个神经递质激活和激活的神经系统。我们已经建立了一个模型,基本的研究结果是:组胺通过突触Spalt参与神经胶质的运输,并通过N-乙酰-丙氨酸-组胺(Carcinin)的Ebony-Protein转运。癌蛋白在光反应器中的运输主要是水解蛋白质-丙氨酸和组胺。组胺将在Vesikel中包装,而β-丙氨酸将在胶质细胞中运输。Als weiteren Nachweis für die acquitenz dieses vollkommen neurotransmitterkreislaufs nach der Charakterisierung und Lokalisierung des Ebony Proteins,wollen wir die zelluläre und subzelluläre Expression von Tan in den Photorezeptoren mit Hilfe von Anti-Tan-Peptid Antikörpern bestimmen.我们要把它的生化活性提高到最好。我们感兴趣的是,使用产黄青霉酶、异青霉素-N N-酰基转移酶的Tan测序,也可以发现酰胺水解酶和酰基转移酶的活性特征,从而获得一种自蛋白水解反应过程。Hinweise auf die Bedeutung der nachgewiesenen Aktivitäten für das Sehvermögen wollen wir durch gezielte Mutagenese erhalten.

项目成果

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