Longitudinal cloning and genetic characterization of human pemphigus autoantibodies in active disease, remission, and relapse

活动性疾病、缓解和复发中人天疱疮自身抗体的纵向克隆和遗传特征

• 批准号: 217006138
• 负责人: Privatdozent Dr. Matthias Christoph Hammers
• 金额: --
• 依托单位: Klinik für Dermatologie, Allergologie und Venerologie (Hautklinik)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2011-12-31 至 2015-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/217006138?language=en
• 关键词: Longitudinal; cloning; genetic; characterization; human

Pemphigus vulgaris (PV) und Pemphigus foliaceus (PF) stellen Prototypen gewebespezifischer, blasenbildender Autoimmunerkrankungen der Haut und Schleimhäute dar und zeichnen sich durch Autoantikörper (Auto-AK) gegen die Keratinozyten-Adhäsionsproteine Desmoglein 3 (Dsg 3) und Desmoglein 1 (Dsg 1) aus. Trotz Verfügbarkeit des monoklonalen anti-CD20-AK Rituximab sind aktuelle Therapieansätze unspezifisch: Rituximab eliminiert nicht nur pathogene, sondern fast alle zirkulierenden B-Zellen, und die Entwicklung zielgerichteter Therapien (z. B. antiidiotypische AK) unter Erhalt der Funktion des Immunsystems des Patienten ist erstrebenswert. Die innovative Technik des Phage Displays (PhDp) erlaubt eine genetische Charakterisierung humaner anti-Dsg 3/1-AK von PV-/PF-Patienten, die als scFvs kloniert und nach Pathogenität unterteilt werden können. Basierend auf Vorbefunden geht dieses Projekt von der Hypothese aus, dass über den gesamten Verlauf des Pemphigus (mit Erstmanifestation, Remission, Rückfall) nur ein charakteristisches oligoklonales Set von anti-Dsg-B-Zell-Klonen vorliegt, und die resultierenden Auto-AK mit der Zeit Affinitätsreifung durch somatische Hypermutation erfahren. Auch nehmen wir an, dass Rituximab in einigen Patienten eine vollständige Remission ohne Entwicklung neuer B-Zell-Klone induziert. Diese Hypothesen werden getestet durch a) Einsatz des PhDp, um anti-Dsg-AK in PV-/PF-Patienten longitudinal zu klonieren, b) Anwendung des PhDp, um etwaige anti-Dsg-B-Zell-Klone in mittels Rituximab remittierten Patienten zu detektieren, und c) Bestimmung der klonalen Verwandtheit, der somatischen Hypermutation und der Bindung an gemeinsame Dsg-Epitope der klonierten Auto-AK in rückfälligen Patienten. Die Ergebnisse dieser Longitudinalstudie werden zum besseren Verständnis der Pathophysiologie und der Entwicklung spezifischerer Therapien des Pemphigus beitragen. Auch können so grundlegende, autoimmune B-Zell-Prozesse im Menschen besser verstanden und erklärt werden.

寻常型天疱疮（PV）和落叶型天疱疮（PF）通过自身抗血清（Auto-AK）诱导产生角质酶-粘附蛋白Desmoglein 3（Dsg 3）和Desmoglein 1（Dsg 1），从而产生上、下自体免疫应答。抗CD 20-AK单克隆抗体Rituximab的临床试验是一种非特异性的治疗方法：Rituximab不努尔致病基因，快速消除B-Zellen抗体，并进行临床试验。B。抗独特型抗体（antiidiotypische AK）在患者免疫系统功能的恢复中发挥作用。噬菌体展示技术（PhDp）的创新在于开发了一种人源抗Dsg 3/1-AK的PV-/PF-患者的遗传学特性，这些scFv克隆和致病性不受韦尔登。根据这一假说，我们对天疱疮的早期表现、缓解、复发进行了研究，结果显示，抗Dsg-B-Zell-Klonen抗体具有明显的低钾血症特征，而Auto-AK抗体则通过机体的超突变产生了特异性亲和力。我们也认为，利妥昔单抗在一个新的B-Zell-Klone诱导的患者中具有很大的缓解作用。该假设可通过以下方法得到验证：a）在PV-/PF-患者中建立PhDp，将抗Dsg-AK抗体纵向定位于克隆; B）在利妥昔单抗治疗患者中建立PhDp，将抗Dsg-B-Zell-Klone抗体定位于克隆; c）在rückfälligen患者中确定克隆Verwandtheit、体细胞超突变和与克隆Auto-AK的相同Dsg-表位结合。韦尔登的纵向研究有助于了解天疱疮的病理生理学和发展特异性治疗。同样重要的是，自身免疫性B细胞癌在人类中更容易被理解和韦尔登。