TIRF Mikroskop mit FRAP und Hochauflösung

点击翻译按钮获取中文摘要

Das Gerät ist für den Ausbau des „Imaging Center Essen“ (IMCES) vorgesehen. Das IMCES ist zentraler Bestandteil der immunologisch/infektiologisch/zellbiologischen Forschung an der Medizinischen Fakultät. Das Gerät wird im medizinischen Forschungszentrum (MFZ) stehen. Es ist das einzige TIRF-Mikroskop mit strukturierter Beleuchtung auf dem Campus und steht allen interessierten Nutzern der UK-Essen und der Universität Duisburg/Essen zur Verfügung. Um ein möglichst breites Anwendungsspektrum zu ermöglichen, ist das Gerät mit einer Reihe moderner Ausstattungsmerkmale ausgerüstet. Diese sind: (1) eine TIRF Einheit, die die simultane Detektion von TIRF Bildern und die Einstrahlung eines Bleichlasers für FRAP- oder Photoaktivierungsexperimente zulässt. So können erstmals Experimente gemacht werden, bei denen die Dynamik membrannaher Proteinkomplexe unter Echtzeitbedingungen analysiert wird. (2) Eine Einheit zur Erzielung sehr hoher Auflösung im Bereich von 85nm mithilfe strukturierter Beleuchtung (SIM) im Weitfeld und im TIRF Modus. Auch diese Einheit ist mit der FRAP Lösung kombinierbar. (3) Eine Inkubationskammer für Lebendproben. (4) Ein einfaches 3-Kanal Konfokalsystem, das zum Steuern des Bleichlasers, aber auch für Standard Konfokalexperimente genutzt werden kann. (5) Eine Erweiterung des Systems um die Möglichkeit für stochastische Hochauflösung (STORM, PALM) die mit geringem Mehraufwand möglich ist, und dadurch auch diese Superresolutionsverfahren verfügbar macht. Die wichtigen Messverfahren TIRF und speziell SIM sowie PALM/STORM sind bisher nicht für Wissenschaftler der UK-Essen verfügbar, obwohl ihr Einsatz in der modernen zellbiologischen Forschung immer stärker nachgefragt wird. Dies wird durch die aktuelle Literatur und die vorgelegten von Projektskizzen klar belegt.