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Verbundverfahren zur Detektion von Mikroorganismen imTrinkwasser

饮用水中微生物的组合检测方法

基本信息

批准号：
26641662
负责人：
Privatdozent Dr. Michael Seidel
金额：
--
依托单位：
Lehrstuhl für Analytische Chemie und Wasserchemie
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2006
资助国家：
德国
起止时间：
2005-12-31 至 2010-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/26641662?language=en
关键词：
Verbundverfahren zur Detektion von Mikroorganismen

项目摘要

Laut Trinkwasserverordnung dürfen im Wasser keine Krankheitserreger sein, die eine Schädigung der menschlichen Gesundheit verursachen können. Die derzeit für Routineuntersuchungen angewandten mikrobiologischen Methoden sind zu zeitaufwendig, um alle infrage kommenden pathogenen Keime separat nachzuweisen. Als Indikatorkeime für eine Fäkalverunreinigung werden nur die Keimzahlen von Escherichia coli und den coliformen Keimen bestimmt. Die Microarray-Technologie kommt in der Bioanalytik bereits in den Forschungsfeldern zum Einsatz, wo es auf hohe Informationsdichte ankommt. Sie hätte das Potential, mit einem Microarray-Chip alle relevanten pathogenen Keime zu delektieren. In diesem Forschungsvorhaben soll gezeigt werden, dass aus dem Trinkwasser mit einem quasikontinuierlichen Verbundverfahren, bestehend aus Querstrom- Mikrofiltration (Anreicherung), immunmagnetischer Separation (Vorselektion) und einem parallelen Immunsensor-Array (PASA; zum definitiven Nachweis) pathogene Keime von Escherichia coli und von coliformen Keime bestimmbar sind. Die Querstrom-Mikrofiltration dient als schnelle Voranreicherungsmethode. Die Mikroorganismen werden in Suspension gehalten und können unbeschadet auf einer magnetischen Säule selektiert werden. Die immunmagnetische Separation geschieht über superparamagnetische Nanopartikel, an die Antikörper gekoppelt werden. Eingesetzt werden kommerziell erhältliche polyklonale Antikörper, die gegen Escherichia coli bzw. gegen die coliforme Keime Klebsiella sp., Salmonella sp. und Campylobacter sp. gerichtet sind. Eine säulenbasierte immunmagnetische Separation hat einen entscheidenden Vorteil für den quasikontinuierlichen Prozess. Es kann ein Immunoassay im Sandwich- Format durchgeführt werden, bei dem die Markierungs- und Reinigungsschritte auf der Säule geschehen. Das Nachweissystem wird nicht mit der Matrix und dem überschüssigen Reagenz belastet. Als Nachweissystem kommt eine Fließinjektionstechnik in Form des parallelen Immunsensor-Arrays (PASA) zum Einsatz. Die Unterscheidung einzelner pathogener und nichtpathogener Stämme soll über hochspezifische monoklonale Antikörper erfolgen, die im Microarray-Format immobilisiert werden. Die Signale, die eine Kontamination anzeigen, werden durch Chemilumineszenz generiert und über eine CCD-Kamera quantitativ registriert.

Trinkwasserverordnung dürfen im瓦塞尔keine Krankheitserreger sein，die eine Schädigung der menschlichen Gesundelleverursachen können.采用微生物学方法进行细菌培养的时代已经到来，所有已知的病原体都已分离。Als Indikatorkeime für eine Fäkalverunreinigung韦尔登努尔die Keimzahlen von Escherichia coli und den coliformen Keimen bestimmt.微阵列技术在生物分析中的应用是一项重要的研究，也是一项重要的信息技术。你有潜力，用一个微阵列芯片来检测所有相关的病原体。在土壤韦尔登研究中，使用准连续的微生物过滤器，通过Querstrom- Mikrofiltration（Anreicherung）、免疫磁分离（Vorselektion）和平行免疫传感器阵列（PASA; zum definitiven Nachweis）检测大肠杆菌和大肠杆菌型致病基因。Querstrom-Mikrofiltration成分是一种简单的Voranreicherungsmethod。Die Mikroorganismen韦尔登in Suspension gehalten and können unbeschadet auf einer magnetischen Säule selektiert韦尔登.免疫磁性分离技术是超顺磁性纳米粒子，是一种韦尔登。Eingesetzt韦尔登kommerziell erhältliche polyklonale Antikörper，die gegen Escherichia coli bzw.克雷伯氏菌属，沙门氏菌和弯曲杆菌一种基于säulenbasierte的免疫磁性分离方法，用于准连续过程。这是一种通过韦尔登形式进行的免疫测定，可用于标记和补充样品。Nachweissystem wird not mit der Matrix and dem überschüssigen Reagenz belastet. Nachweissystem以并行免疫传感器阵列（PASA）的形式提供了一种Fließinjektionstechnik。Die Unterscheidung einzelner pathogener und nichtpathogener Stämme soll über hochspeziatre he monoklonale Antikörper erfolgen，die im Microarray-Format immobilisiert韦尔登韦尔登.通过化学发光法产生的信号，即污染物检测韦尔登，并通过CCD摄像机进行定量记录。