Entwicklung Aptamer-basierter Methoden zur Detektion und Aufreinigung rekombinanter Proteine in der Biotechnologie

开发基于适体的生物技术重组蛋白检测和纯化方法

基本信息

项目摘要

Die Produktion vieler biologisch aktiven Substanzen gelingt in der Biotechnologie mit Hilfe von Zellkulturtechniken. Die Proteine werden dabei in Mikroorganismen oder Säugertierzellen produziert. Dadurch ergibt sich häufig eine hohe Komplexität des Rohproduktes, welches das gewünschte Zielprotein oft nur als Minorkomponente enthält. Vor diesem Hintergrund werden effektive und sensitive Methoden zur Detektion und Aufreinigung der Zielproteine notwendig. Ziel des vorliegenden Forschungsprojektes ist daher die Bereitstellung neuartiger Aptamerbasierter Methoden zur Detektion sowie zur effektiven und schonenden Aufreinigung der Zielproteine. Dabei sollen zwei große Gruppen der rekombinanten Proteine erfasst werden: I) Antikörper: Es wird im Rahmen der geplanten Arbeiten ein Aptamer gegen das Fc- Fragment von Antikörpern bereitgestellt sowie Methoden zur Aptamer-basierten Detektion und Aufreinigung der Antikörper aus Zellkulturproben etabliert. II) Fusionsproteine: Bei diesen Proteinen wird ein so genannter Tag an das Protein fusioniert. Häufig findet dabei der His-Tag Anwendung. Im Rahmen der geplanten Arbeiten werden Aptamere gegen den His- Tag als Affinitätselement zur Entwicklung von Detektions- und Aufreinigungsmethoden verwendet. Darüber hinaus sollen Aptamere gegen den GST-Tag eingesetzt werden.
生物制品维勒生物制品在美国麻省理工学院生物工程学院生产明胶。在S的产品中,蛋白质是大体的。我们从罗普尔德罗普尔德斯图尔特公司获得了一种新的、更好的产品。我们对此进行了有效而敏感的检测,并对其进行了检测。这是一种新的方法和方法,它的效率和效率都很高。我的工作是:I)工作人员:我)工作人员:Es wird im Rahmenen der geants en arbeiten ein ApTamer gegen das FC-Fragment von Antikörpern bereitsterellt Sowie Methoden zur ApTamer-Basierten Detektion and Aufreinigung der Antikörper Aus Zellkulturproen etabliert.Ii)融合蛋白:Bei Diesen Proteinen Well ein因此基因标记一个das蛋白融合蛋白。Häuig在他的标签Anwendung下找到了一个大北。我是Arbeiten的拉赫曼和他的标签ALS亲缘关系zur Entwickung von Detektions-and AufreinigungsMethoden verwendet。Darüber hinaus Sollen ApTamere gegen den GST-tag eingesetzt.

项目成果

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Aptamers as detection molecules on reverse phase protein microarrays for the analysis of cell lysates
适体作为反相蛋白微阵列上的检测分子,用于分析细胞裂解物
  • DOI:
    10.1002/elsc.201100100
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.7
  • 作者:
    Miriam Lübbecke;Johanna-Gabriela Walter;Frank Stahl;Thomas Scheper
  • 通讯作者:
    Thomas Scheper
Aptamer-modified magnetic beads in affinity separation of proteins.
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  • DOI:
    10.1007/978-1-4939-2447-9_7
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Guohong Zhu;Johanna-Gabriela Walter
  • 通讯作者:
    Johanna-Gabriela Walter
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