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白色腐朽菌の環境汚染物質代謝能の意義解明及び汚染環境浄化への発展的応用

阐明白腐真菌代谢环境污染物能力的意义及其在污染环境净化中的进一步应用

基本信息

批准号：
21H04744
负责人：
平井浩文
金额：
$ 27.21万
依托单位：
Shizuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-05 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H04744/
关键词：
バイオレメディエーション白色腐朽菌シトクロムP450 毒性評価

项目摘要

(1) 環境汚染物質代謝CYPライブラリーの構築本研究の供試菌であるPhanerochaete sordida YK-624株は214種のシトクロムP450（CYP）遺伝子を有しおり、これらCYPが代謝可能な環境汚染物質を決定し、環境汚染物質代謝CYPライブラリーを構築することを目的に、P. sordida YK-624株からのCYP遺伝子（cDNA）の取得及び発現プラスミドの構築を行った。その結果、214種類のCYP遺伝子のうち、168種のCYP/CPR共発現プラスミドの作成に成功した。さらに、168種のCYP遺伝子のうち、114種の酵母への導入に成功した。また、214種類のCYPについて系統樹を作成した結果、本CYPは31のfamilyに分類されることが判明した。(2) P. sordida YK-624株の与える分解代謝産物の生物学的意義の解明『白色腐朽菌は環境汚染物質を、環境中に存在する微生物が分解可能となる形にまで代謝している』という仮説を証明すべく、アセタミプリド及びイミダクロプリドの代謝に関与するCYPの同定を試みたが、上述の114種のCYP中に代謝に関与するCYPは存在しなかった。なお、本年度は、次年度以降に実施する土壌における分解挙動を追跡する上で必要となる「土壌中細菌由来RNAの抽出法」を確立した。

(1)Construction of CYPs for Environmental Pollutants Metabolism In this study, Phanerochaete sordida YK-624 strain was tested for the production of 214 CYP gene fragments, for the determination of CYPs that may metabolize environmental pollutants, for the construction of CYPs for environmental pollutants metabolism, and for the acquisition and development of CYP gene fragments (cDNA) for P. sordida YK-624 strain. The results showed that 214 CYP genes and 168 CYP/CPR genes were successfully developed. In addition, 168 CYP genes and 114 yeasts were successfully introduced. The results of the phylogenetic tree of 214 CYP species were identified. (2)To clarify the biological significance of catabolite of P. sordida YK-624 strain and the existence of microorganisms in the environment and the possibility of decomposition and metabolism of environmental pollutants. To prove the identification of CYPs and the existence of CYPs in the metabolism of 114 kinds of CYPs. This year, the next year, we will continue to implement the "RNA Extraction Method from Bacteria in Soil".