白色腐朽菌の環境汚染物質代謝能の意義解明及び汚染環境浄化への発展的応用

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(1) 環境汚染物質代謝CYPライブラリーの構築本研究の供試菌であるPhanerochaete sordida YK-624株は214種のシトクロムP450（CYP）遺伝子を有しおり、これらCYPが代謝可能な環境汚染物質を決定し、環境汚染物質代謝CYPライブラリーを構築することを目的に、P. sordida YK-624株からのCYP遺伝子（cDNA）の取得及び発現プラスミドの構築を行った。その結果、214種類のCYP遺伝子のうち、168種のCYP/CPR共発現プラスミドの作成に成功した。さらに、168種のCYP遺伝子のうち、114種の酵母への導入に成功した。また、214種類のCYPについて系統樹を作成した結果、本CYPは31のfamilyに分類されることが判明した。(2) P. sordida YK-624株の与える分解代謝産物の生物学的意義の解明『白色腐朽菌は環境汚染物質を、環境中に存在する微生物が分解可能となる形にまで代謝している』という仮説を証明すべく、アセタミプリド及びイミダクロプリドの代謝に関与するCYPの同定を試みたが、上述の114種のCYP中に代謝に関与するCYPは存在しなかった。なお、本年度は、次年度以降に実施する土壌における分解挙動を追跡する上で必要となる「土壌中細菌由来RNAの抽出法」を確立した。