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白色腐朽菌の代謝切り替えスイッチとしての水分活性センシング機構の解明

阐明白腐真菌代谢开关的水分活度传感机制

基本信息

批准号：
19J23714
负责人：
元田多一
金额：
$ 1.98万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

沖縄のマングローブ林より単離された白色腐朽菌Phlebia sp. MG-60株は固相条件下では選択的な脱リグニンを行うが、液体培地では多糖分解酵素を分泌し糖質の分解と代謝を盛んに行う。この事から、白色腐朽菌における水分活性センシング機構に注目し、高浸透圧応答MAPK経路（HOG経路）に着目した。Phlebia sp. MG-60-P2株（Phlebia sp. MG-60株由来のプロトプラスト再生株）のHOG1様遺伝子（MGhog1）の全長配列を取得した。MGhog1の配列を基にMGhog1-RNAi コンストラクトおよび MGhog1 恒常発現コンストラクトを作製し、MGhog1発現抑制株 (KD株) および発現誘導株 (OE株) を作製した。コントロール（空ベクター導入株）と比較してKD株は、PDA培地（寒天培地）およびNaCl添加PDA培地上において生長が抑制される傾向が見られ、 OE株は、NaCl添加PDA培地上において生長が強く抑制される傾向が見られた。PDB培地（液体培地）で各菌株を培養したところ、コントロールと比較してKD株は生長が早く、OE株は生長が遅い傾向が見られ、菌糸の生長に比例してグルコースは消費され、培地中のエタノール濃度は上昇する傾向が見られた。振盪培養条件下 (160 rpm)では、KD株およびOE株の菌体生長速度はコントロールと変わらないが、KD株のエタノール発酵能はコントロールと比較して高い傾向が見られた。コントロールでは培養上清中に分裂子様異形細胞が確認されたが、OE株では分裂子様異形細胞は確認されず、KD株では培養上清中の分裂子様異形細胞数がコントロールと比較して多くなる傾向が見られた。これらの結果より、本菌のエタノール発酵、菌体生長および菌糸の形態形成はHOG経路を介して制御される可能性が示唆された。

The white rot fungus Phlebia sp was isolated from the forest. Under the condition of solid phase, MG-60 strain was selected to exfoliate polysaccharides, polysaccharides and polysaccharides in liquid culture. The water activity of white rot fungus, water activity, water activity Phlebia sp. MG-60-P2 strain (Phlebia sp. The whole length of MG-60 strain was obtained by full-length alignment of HOG1 spores (MGhog1). MGhog1 was assigned to the base line, MGhog1-RNAi, antisense, antisense, MGhog1, constant, and MGhog1, which showed that the suppressor (KD strain) and the leader (OE strain) were used as antigens. The growth of KD and PDA (cold weather) was higher than that of PDA (cold weather). The growth of plant was inhibited by the addition of PDA, and the growth of PDA was strongly inhibited by PDA. In PDB culture (liquid culture), the growth of each strain was earlier than that of KD, the growth rate of OE was higher than that of culture, the proportion of growth of bacteria was higher than that of culture, and the temperature of culture was higher than that of culture. Under the condition of 160rpm, the growth rate of OE strain and KD strain was much higher than that of KD strain, and the cell growth rate was higher than that of yeast culture. The number of mitotic cells in the supernatant of OE strain, OE strain, and the supernatant of KD strain was higher than that in the supernatant. The results of the experiment, the fermentation of the bacteria, the growth of the bacteria and the formation of HOG pathogens indicate that it is possible to control the bacteria.