人工リポタンパク質の新機能探求：材料-細胞相互作用解析を基軸とする経口製剤化研究

人工脂蛋白新功能探索：基于材料-细胞相互作用分析的口服制剂研究

• 批准号: 21J01088
• 负责人: 福田 亮介
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J01088/
• 关键词: リポタンパク質; 経口投与製剤; Caco-2細胞; 化学安定性

本研究の目的は、血中リポタンパク質の模倣体（人工HDL）を試験管内で調製し、小腸上皮様細胞との相互作用の解析を通じて、人工HDLを経口投与製剤として応用できる可能性を検証することである。まず人工HDLおよび比較対象として用いたリポソームを酢酸緩衝液（pH 4.4）中、37°Cにおいて24時間静置した後、粒度分布測定を行った。その結果、リポソームのみで凝集体形成を示唆するデータが得られた。一方で同条件において人工HDLでは粒度分布にほとんど変化はなく、少なくとも24時間は酸性緩衝液中で安定であることが明らかになった。次に小腸上皮細胞モデルとして用いたCaco-2細胞をTranswellインサート上に播種して分化させ、蛍光標識した人工HDLあるいはリポソームを6時間作用させて、各ナノ粒子の通過効率を調べた。その結果、今回の実験条件においては、リポソームの場合Caco-2細胞単層の頂端側から基底側への通過が確認されなかったのに対し、人工HDLではわずかではあるが通過することがわかった（1%以下）。加えて、分光光学的手法を利用して、単層通過した人工HDLが崩壊していないことを明らかにした。以上の結果より、人工HDLで確認されたCaco-2細胞単層通過は、人工HDLが示す酸性溶液中における高い化学安定性によるものだと推察された。以上より、過去に論文報告されてきたリポソーム製剤よりも高効率に小腸上皮の通過を促進できる可能性のある人工リポタンパク質を見出だすことに成功した。

は の purpose, this study blood リ ポ タ ン パ ク qualitative の mimic body (artificial HDL) を で modulation し test tube and others in the small intestine epithelium cells と の interaction の parsing を tong じ て, artificial HDL を 経 mouth cast and tonic と し て 応 with で き る possibility を 検 card す る こ と で あ る. ま ず artificial HDL お よ び comparison like と seaborne し て in い た リ ポ ソ ー ム を boggy acid buffer (pH 4.4), 37 ° C に お い て 24 time let stand し た, determination of particle size distribution after line を っ た. The そ られた results, リポソ ム ム みで aggregates formed を, suggesting するデ タが タが タが られた られた られた. Side で with conditions に お い て artificial HDL で は size distribution に ほ と ん ど variations change は な く, less な く と も 24 time は で stable in acidic buffer で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. Time に intestinal epithelial cells モ デ ル と し て in い optimization た Caco - 2 cells を Transwell イ ン サ ー ト に on sowing し て differentiation さ せ 蛍 light logo し た artificial HDL あ る い は リ ポ ソ ー ム を 6 time role さ せ て, various ナ の ノ particles through the working rate を adjustable べ た. そ の results, today back to の be 験 conditions に お い て は, リ ポ ソ ー ム optimization の occasions Caco - 2 cells 単 side of the top layer の か ら basal side へ の confirms through が さ れ な か っ た の に し seaborne, artificial HDL で は わ ず か で は あ る が through す る こ と が わ か っ た (below 1%). Add え て, the spectral optical technique を USES し て, 単 layer through し た artificial HDL が collapse 壊 し て い な い こ と を Ming ら か に し た. の above results よ り, artificial HDL で confirm さ れ optimization た Caco - 2 cells through は 単 layer, artificial HDL が す in acidic solution に お け る high chemical stability に い よ る も の だ と push examine さ れ た. Above よ り, past に paper さ れ て き た リ ポ ソ ー ム system tonic よ り も high working rate に intestinal epithelial の promote で by を き る possibility の あ る artificial リ ポ タ ン パ ク qualitative を shows だ す こ と に successful し た.