マルチステップ作用を特徴とする革新的アミロイドーシス治療薬の開発

开发具有多步骤作用的创新淀粉样变性疗法

• 批准号: 21J11627
• 负责人: 井上 雅理
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J11627/
• 关键词: デンドリマー; シクロデキストリン; shRNA; ポリプレックス; アルツハイマー病; トランスサイレチン; アミロイドβ; アミロイドーシス

シクロデキストリン修飾デンドリマー (CDE) に、Aβ 産生酵素 (BACE1) を標的とした shRNA (shBACE1) を混合し、CDE/shBACE1 複合体を調製後、以下の研究を実施した。(1) アルツハイマー病 (AD) に対する CDE/shBACE1 の治療効果 (in vitro). まず、マウス神経芽腫由来 Neuro-2a 細胞に対して、CDE/shBACE1 をトランスフェクションした結果、BACE1 mRNA レベルを有意に減少することが示唆された。次に、Neuro-2a 細胞に Aβ42 および CDE/shBACE1 を処理した結果、CDE/shBACE1 は、細胞培養液中で Aβ42 アミロイドの細胞毒性を減弱させる可能性が示唆された。(2) AD に対する CDE/shBACE1 の in vivo 治療効果 (in viro). AD の病態後期モデルであるヒト APP Knock-in マウス (12 カ月齢) に対して、CDE/shBACE1 を 1 週間に 1 回、三種混合麻酔下、脳室内投与した結果、投与部位近傍の標的タンパク質の発現を約 10 % 抑制することが示唆された。また、脳内 Aβ の発現をコントロール群と比較して、有意に抑制することが示唆された。さらに、本化合物を投与した条件において、体重、組織重量および脳内炎症サイトカインレベルのいずれも顕著な変化は観察されなかった。3. 種々のアミロイドーシスに対する CDE/shRNA のin vitro 治療効果CDE/shRNA 複合体は、インスリンおよびβ2-ミクログロブリンのアミロイド形成を阻害することが示唆された。また、あらかじめアミロイドを形成させた条件においても、CDE/shRNA 複合体は、アミロイド量を減少させることが示唆された。

After modulation of shRNA (shBACE1) and CDE/shBACE1 complex, the following studies were carried out (1)CDE/shBACE1 treatment effect (in vitro). Neuro-2a cells are responsible for the expression of CDE/shBACE1 mRNA. The results of Aβ42 and CDE/shBACE1 treatments in Neuro-2a cells indicate that the cytotoxicity of Aβ42 and CDE/shBACE1 in cell culture medium is attenuated. (2)AD CDE/shBACE1 in vivo treatment results (in viro). AD's late stage of disease, CDE/shBACE1, 1 cycle in 1 week, 3 kinds of mixed hemp, indoor injection results, injection site near the target quality of the occurrence of about 10% inhibition. Aβ is present in the plasma and is intentionally suppressed. The compound is administered under conditions such as body weight, tissue weight, and inflammation. 3. The CDE/shRNA complex in vitro therapeutic effects of CDE/shRNA on the effector system has been shown to inhibit the formation of effector cells in the effector system and the β2-oligonucleotide. The CDE/shRNA complex was found to be able to reduce the amount of DNA in the cells.

项目成果

Feasibility Study of Dendrimer-Based TTR-CRISPR pDNA Polyplex for Ocular Amyloidosis <i>in Vitro</i>

基于树枝状大分子的 TTR-CRISPR pDNA 复合物治疗眼部淀粉样变性<i>体外</i>的可行性研究

• DOI: 10.1248/bpb.b22-00452
• 发表时间: 2022
• 期刊: Biological and Pharmaceutical Bulletin
• 影响因子: 2
• 作者: Inoue M;Muta K;Mohammed AFA;Onodera R;Higashi T;Ouchi K;Ueda M;Ando Y;Arima H;Jono H;Motoyama K.
• 通讯作者: Motoyama K.

家族性アルツハイマー病治療薬としての糖修飾デンドリマー/shRNA複合体の有用性評価

糖修饰树枝状聚合物/shRNA复合物作为家族性阿尔茨海默病治疗剂的有效性评估

• 发表时间: 2021
• 作者: Hayashi Yuki;Suzuki Shuichi;Suzuki Takanori;Ishigaki Yusuke;井上雅理
• 通讯作者: 井上雅理

脳アミロイドーシス治療薬としてのシクロデキストリン修飾樹状高分子ポリプレックスの可能性評価

环糊精修饰的树枝状聚合物复合物作为脑淀粉样变性治疗剂的潜力评估

• 发表时间: 2021
• 作者: 黒田 恭平;成廣 隆;藤井 直樹;中島 芽梨;景政 柊蘭;中井 亮佑;佐藤 久;久保田 健吾;金田一 智規;井上雅理
• 通讯作者: 井上雅理

シクロデキストリン修飾デンドリマー/short hairpin RNA 発現ベクターポリプレックスのアミロイド阻害機構の解明

阐明环糊精修饰的树枝状聚合物/短发夹RNA表达载体聚合体的淀粉样蛋白抑制机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 井上雅理;城野博史;小野寺理沙子;東 大志;本山敬一
• 通讯作者: 本山敬一

家族性アルツハイマー病に対する shRNA ポリプレックスの多段階治療戦略

shRNA 复合物治疗家族性阿尔茨海默病的多步治疗策略

• 发表时间: 2022
• 作者: 井上雅理;城野博史;齊藤貴志;小野寺理沙子;東 大志;本山敬一
• 通讯作者: 本山敬一