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疾患iPS細胞由来ミクログリア・内皮細胞を用いたハンチントン病の病態解明

使用 iPS 细胞来源的小胶质细胞和内皮细胞阐明亨廷顿病的病理学

基本信息

批准号：
21J15785
负责人：
山下美紗季
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

初めに、昨年度に作製したHD患者由来iPS細胞（HPS２３７９株）および健常者由来iPS細胞（６１０B１株）由来造血前駆細胞を用いてミクログリアへの分化誘導を行った。ミクログリア分化マーカーであるP２RY１２およびTREM２の発現を確認したところ、６１０B１株由来分化細胞およびHPS２３７９株由来分化細胞のいずれにおいてもP２RY１２およびTREM２両方の発現を確認することができた。さらに、ミクログリア培養液中の炎症性サイトカインレベルを測定したところ、６１０B１株由来分化細胞およびHPS２３７９株由来分化細胞の両方で同等であった。次に、HPS２３７９株および６１０B１株を用いてBMECsへの分化誘導を行った。細胞間バリアの指標である経内皮電気抵抗値を測定したところ、６１０B１株由来分化細胞と比較してHPS２３７９株由来分化細胞の方が有意に低い抵抗値を示した。続いて、６１０B１株由来分化細胞（ミクログリアおよびBMECs）とHPS２３７９株由来分化細胞（ミクログリアおよびBMECs）を組み合わせて共培養を行い、経内皮電気抵抗値と炎症性サイトカインレベルを測定した。その結果、６１０B１株由来BMECsはミクログリアとの共培養により経内皮電気抵抗値が上昇したのに対し、HPS２３７９株由来BMECsでは変化が見られなかった。また、ミクログリアと共培養した群では、いくつかの炎症サイトカインレベルが減少していた。これらの結果から、HPS２３７９株由来BMECsでは何らかの理由でミクログリアによるバリア機能が向上していない可能性が示唆された。さらに、共培養群ではいくつかの炎症性サイトカインレベルが低下しており、HPS２３７９株由来BMECsによってミクログリアが活性化されているわけではないことが確認された。

IPS cells derived from HD patients (HPS2379 strain) produced by Haru last year and derived from healthy people iPS cells (strain 610B1) are derived from hematopoietic pre-hematopoietic cells and are differentiated and induced by いてミクログリアへの.ミクログリアdifferentiation マーカーであるP2RY12およびTREM2の発成をconfirmationしたところ、610B1 strain origin differentiation cells およびHPS2379 strains are derived from differentiated cells. Determination of inflammatory サイトカインレベルを in さらに、ミクログリア culture medium したところ、６１ The cells derived from the 0B1 strain are the same as the cells derived from the HPS2379 strain. For the second time, the HPS2379 strain and the 610B1 strain were used to induce differentiation of BMECs. Measurement of intracellular intracellular resistance to endothelial resistance and the origin of 610B1 strain Comparative analysis of cells derived from HPS2379 strain showed that the resistance of cells derived from HPS2379 was low. Differentiated cells derived from 続いて, 610B1 strain (MicroBMECs) and HPS 2379 strain derived differentiated cells (MicroBECs) The results of the co-culture of BMECs (BMECs) and endothelial resistance of the group were measured. As a result, BMECs derived from the 610B1 strain were co-cultured with BMECs Resistance to the rise of resistance, HPS 2379 strains are derived from BMECs and resistance to growth.また, ミクログリアと co-culture したgroup では, いくつかのinflammatory サイトカインレベルがしていた. Reasons for the results of これらの, and the origin of HPS2379 strains: BMECsでミクログリアによるバリアfunctionalityがUPしていないpossibilityがshows instigationされた.さらに, co-culture group ではいくつかのinflammatory サイトカインレベルがlow しており, HPS2３７９ The origin of the strain is BMECs, which has been confirmed by activation of BMECs.