Development of nobel assay methods for miRNA and adenine methyltransferase using FRET

使用 FRET 开发 miRNA 和腺嘌呤甲基转移酶的诺贝尔检测方法

基本信息

  • 批准号:
    21K05120
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

申請者は、分析化学分野で広く使用されている蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)のバックグランドを大幅に低下させる方法を見出し、それを応用したDNA中のシトシンをメチル化する酵素の活性測定法を開発している。本研究課題では、この方法をもとに、様々な疾患に関与するマイクロRNA(miRNA)およびエピジェネティクスに関与しているアデニンのメチル化/脱メチル化酵素の簡便で特異的かつ高感度な測定法の開発を目的としている。miRNAは、様々な生命現象と関わっており、さらに各種がんや心疾患、ウイルス感染症など、種々の疾患のバイオマーカーとしても注目されている。また、miRNA中のアデニンもメチル化されることが報告され、アデニンメチル化酵素についても、これら疾患との関連性が注目されている。しかし、これらの検出・測定法は、特別な機器や試薬、煩雑な操作が必要である。本課題の目的とする検出・測定法は、特別な機器や試薬を必要とせず、非常に簡便な測定法であり、生命科学や医療分野における汎用性の高い新たな解析ツールとなり得ると考える。これまでに、シトシンおよびアデニンメチル化酵素について、エピジェネティクス研究で使用されているメチル化塩基を認識して切断できる制限酵素とFRETを組み合わせた、新規活性測定法を開発した。現在、生体試料中の酵素活性が測定できるか調査中である。miRNA検出系については、miRNAの配列に特異的な蛍光検出法を開発できた。現在、検出感度を高めるための磁気マイクロビーズを使用した、miRNAの効率的な回収方法、および、蛍光検出の条件を検討中である。
荧光增白剂,分析化学诱变剂,利用荧光素共聚焦荧光转移酶(FRET),采用荧光定量PCR法测定大量下丘脑的色素活性,荧光定量PCR法,利用荧光DNA中的荧光素还原酶,荧光素化酶,荧光素酶活性测定法。本研究采用免疫荧光、免疫方法检测、墙板脱落细胞与微RNA(miRNA)介导的免疫荧光检测与骨肉瘤细胞免疫荧光化/诱导凋亡化因子检测及特异性的高灵敏度免疫测定法检测目的性骨肉瘤。小核糖核酸,墙板生命体征异常正常,心肌各型心脏疾病,心肌感染性疾病,墙板疾病的早期护理异常异常正常,注目异常正常。RNA,miRNA中的寡核苷酸序列。しかし、これらの検出·測定法は、特別な機器や試薬、煩雑な操作が必要である。本課題の目的とする検出·測定法は、特別な機器や試薬を必要とせず、非常に簡便な測定法であり、生命科学や医療分野における汎用性の高い新たな解析ツールとなり得ると考える。生物活性测定法,生物活性研究,生物活性测定法。現在、生体試料中の酵素活性が測定できるか調査中である。miRNA配体特异性表达,miRNA配体特异性的荧光定量表达。在,检出灵敏度高的嗜酸性白细胞增多症患者中,使用荧光定量、miRNA表达率的逆转录方法,进行荧光定量、荧光定量检出条件筛选中。

项目成果

期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
A Facile Method to Determine Prolidase Activity Using a Peptide-Specific Fluorometric Reaction
使用肽特异性荧光反应测定脯氨酸酶活性的简便方法
  • DOI:
    10.1248/cpb.c22-00467
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    1.7
  • 作者:
    Tsutomu Kabashima; Nana Hamasaki;Keiko Tonooka and Takayuki Shibata
  • 通讯作者:
    Keiko Tonooka and Takayuki Shibata
Extremely Simple and Rapid HPLC Analysis of Tocilizumab in Human Serum with Selective Precipitation Using Alkylamine
使用烷基胺选择性沉淀对人血清中托珠单抗进行极其简单快速的 HPLC 分析
  • DOI:
    10.1248/cpb.c22-00475
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    1.7
  • 作者:
    Takada Makoto;Watanabe Ichika;Naito Kazuya;Mutoh Junpei;Ohba Yoshihito;Kabashima Tsutomu;Wada Mitsuhiro
  • 通讯作者:
    Wada Mitsuhiro
Adverse Events Following COVID-19 Vaccination in Young Japanese People: A Case-Control Study of the Risk of Systemic Adverse Events by A Questionnaire Survey
日本年轻人接种 COVID-19 疫苗后的不良事件:通过问卷调查进行全身不良事件风险的病例对照研究
  • DOI:
    10.26502/acbr.50170222
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Suehiro Marie;Okubo Shinya;Nakajima Kensuke;Kanda Kosuke;Hayakawa Masanobu;Oiso Shigeru;Kabashima Tsutomu;Fujita Hideaki;Ando Yukio;Muro Takahiro
  • 通讯作者:
    Muro Takahiro
A Facile Method for the Quantification of Urinary Uracil Concentration by a Uracil-Specific Fluorescence Derivatization Reaction
通过尿嘧啶特异性荧光衍生反应定量尿尿嘧啶浓度的简便方法
  • DOI:
    10.1248/cpb.c21-00221
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    1.7
  • 作者:
    Shibata Takayuki;Shimamura Ryosuke;Yamamoto Yuji;Sakurai Hiroki;Fujita Junya;Yamayoshi Asako;Nemoto Toshimitsu;Kabashima Tsutomu
  • 通讯作者:
    Kabashima Tsutomu
ケトプロフェン含有ナノ粒子製剤の調製
含酮洛芬纳米颗粒制剂的制备
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    神谷誠太郎;河津祐輝;椛島力
  • 通讯作者:
    椛島力
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椛島 力其他文献

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    甲斐 雅亮
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    0
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  • 通讯作者:
    甲斐雅亮
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    柴田孝之;島村亮祐;根本俊光;尹 晟;椛島 力;甲斐雅亮
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    $ 2.66万
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作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了