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糖鎖間相互作用のハイスループットなメカニズム解析に向けた可視サイズシステムの構築

构建用于糖链相互作用高通量机械分析的可见尺寸系统

基本信息

批准号：
21K05298
负责人：
長谷川輝明
金额：
$ 2万
依托单位：
Toyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

バクテリアセルロースから構成されたヒドロゲルであるナタデココに対する化学修飾を行い、LeX糖鎖やGM3糖鎖、さらにはGg3糖鎖を導入したナタデココ（それぞれNDC-LeX、NDC-GM3、およびNDC-Gg3と略）を合成した。元素分析によるN/C値や、化学構造選択的な各種染色剤を用いた染色試験により、これらの糖鎖を導入したナタデココが合成できていることを確認した。また、特定の糖鎖を認識するレクチンを用いるとこれらの糖修飾NDCが水中で会合することでも、これらの糖鎖がナタデココに導入できていることを確認した。水溶液中でNDC-LeX同士の会合試験を行い、Ca2+またはNa+の共存でNDC-LeX同士が会合することを確認した。また参照物質としてLeX糖鎖からFuc残基を削除した部分構造であるLacNAcを導入したNDC-LacNAc、Fuc残基に加えてGal残基も削除した部分構造であるGlcNAcを導入したNDC-GlcNAcなども合成し、これらの会合試験も行った。これらの参照実験により、LeX同士の会合にはFuc残基とGal残基の両者が必須であることを確認した。また、NDC-GM3とNDC-Gg3との間のヘテロな糖鎖間相互作用についても評価を行った。NDC-GM3とNDC-Gg3との間の相互作用はCa2+によって誘導されることを確認した。これに関する参照実験としては、GM3の部分構造であるLacおよびGlcを導入したNDC-LacおよびNDC-Glcを用いて、これらの糖修飾ナタデココとGg3との間の相互作用を評価し、GM3糖鎖の末端シアル酸や中間Gal残基がGg3との相互作用に重要であることを確認した。また、NDC-Gg3の代わりにNDC-LacまたはNDC-Galを用いた参照実験でも、Gg3糖鎖のGalNAcや中間Gal残基がGg3との相互作用に重要であることを確認した。

The chemical modification of LeX, GM3 and Gg3 is introduced into the synthesis of NDC-LeX, NDC-GM3 and NDC-Gg3. Element analysis, N/C ratio, chemical structure selection, dyeing test, introduction of sugar chain, synthesis, etc. For example, if you want to know more about sugar chain, you can use it to modify NDC in water. NdC-LeX confluent in aqueous solution, Ca2+ and Na+ confluent in aqueous solution The reference substance was introduced into NDC-GlcNAc by removing the Fuc residue, and the GlcNAc was introduced into NDC-GlcNAc by removing the Fuc residue. The reference sequence is the same as the sequence of Fuc residues and Gal residues The interaction between NDC-GM3 and NDC-Gg3 is discussed. The interaction between NDC-GM3 and NDC-Gg3 was confirmed by Ca2 +-induced interaction. The interaction between Gg3 and Gg3 was evaluated with reference to the introduction of Lac and Glc into Gg3, and the interaction between Gg3 and Gg3 was confirmed to be important for the interaction between Gg3 and Gg3. The NDC-Gg-3 substitution is important for NDC-Lac and NDC-Gal interactions.