Functional analysis of anti-inflammatory protein contained in fish meat water-soluble fraction and its utilization for prevention of non-communicable diseases

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（1）魚類水溶性タンパク質（WSP）に含まれる各種タンパク質の抗炎症作用について，昨年度のミオシン軽鎖に続いて今年は，パルブアルブミン（PA）を人工消化系に供した後，得られた消化物をLPS-刺激マクロファージに作用させ，炎症性サイトカインの分泌抑制作用を調べた。その結果， PAはWSPほどの強いTNF-α産生抑制作用を示さなかったものの，インターロイキン（IL）-6産生を強く抑制した。さらに，同一タンパク質濃度で比較すると，PAはWSPよりも強い抗炎症機能を有していた。TNF-α は炎症反応の開始時にマクロファージから分泌されるので，PAが炎症開始段階の制御に関与している可能性は低い。それゆえ，PAは，TNF-aの分泌によって炎症反応が進行してIL-6が分泌された段階で，抗炎症機能を発現する可能性がある。（2）WSPの主成分がフルクトース2リン酸アルドラーゼとクレアチンキナーゼ（一部断片）であることを，LC-MS/MSによって同定した。この知見をもって2023年度の各成分の機能分析に臨む。（3）昨年度WSPの抗炎症作用を増強させる目的で，メイラード反応を用いた糖鎖導入の効果を見いだしたので，本年度はさらに詳細な検証をおこなった。WSPに対して1／2重量のアルギン酸オリゴ糖（AO：各種タンパク質の抗炎症作用を増強した実績のある被修飾糖）を混合してから凍結乾燥し，これを60℃―相対湿度65％で保持し，経時的にAOが結合したWSPを得た（WSP-AO）。そこで，この抗炎症作用を調査したところ，WSP-AOのTNF-α産生抑制作用は，濃度依存的に増強され，反応6時間で抗炎症作用はほぼ最大値に達した。この時点では，メイラード反応の進行を示す褐変化は顕著に進行していないことから，AO導入は，メイラード反応の初期から中期段階において，充分な抗炎症作用の増強効果を発揮すると判断した。