Plant monitoring by apoplastic reactive oxygen species

通过质外体活性氧监测植物

• 批准号: 21K05854
• 负责人: 安保 充
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Meiji University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05854/
• 关键词: アポプラストROS; ストレスモニタリング; 植物根; apoplast; ROS; plant chip; monitoring

本研究は植物根のアポプラストROSの計測により、植物の状態把握を試みるものである。前年度の実験結果から、ニトロキシル蛍光プローブを用いたダイズアポプラストROSの計測が感度・再現性よく行えることを確認できたので、今年度はその他の植物種の芽生えを用いて実験を行った。バッチ式で1時間プローブ溶液(300μM)にインキュベートすることで、チシャでアポプラストROSの確認ができたが、キュウリではプローブの分解が確認された。シロイヌナズナでは再現性よくROSを確認するには至っておらず、現在も検討中である。次に、経時計測が可能なフロー系の実験では、PDMSを用いたplant chipを作製して分析を行った。検出器としてHPLCの蛍光検出器を用いる系では十分な再現性が得られなかったが、蛍光顕微鏡を用いた流路上の定点観測では再現性のあるデータが得られた。具体的には1.8 mmの流路にダイズ根端を設置し、プローブ溶液を0.5 ml/hで送液した。アポプラストROSの確認のため、DPI (NADPHオキシダーゼ阻害剤)の有無で蛍光を比較したところ、コントロールではアポプラストROSの蛍光が増加したのに対し、DPI添加では植物をインキュベートしないブランク溶液と同様に蛍光強度の変化は見られなかった。さらに、3%NaClストレスを負荷したところ、10分程度で蛍光強度がバックグランドレベルまで低下した。一方、1%NaCl ストレスの場合は、蛍光強度が一旦上昇したのちに低下したが、バックグランドレベルまでは低下しなかった。その他、キチンなどのエリシター処理によるストレスではアポプラストROSは緩やかに上昇し続けた。以上のように、ストレスに対するROSの放出パターンを一部類型化できた。

The purpose of this study is to study the characteristics of plant roots, ROS and plant status. In the previous year, the results of the results of the previous year, the results of the previous year and the results of the previous year. In one hour, the solution (300 μ M) is used to make sure that the ROS is correct, and that the solution is decomposed to make sure that the product is correct. Please make sure that you are in the middle of the conversation and are now in the middle of ROS. It is possible that the secondary and temporary plant chip may be used to analyze the data, and that the PDMS may be used to analyze the data. The exporter, HPLC, the light exporter, the device, the device, The specific setting of the 1. 8 mm flow path and the root end of the flow path, the temperature of the solution is 0. 5 ml/h, and the liquid supply is 0. 5 ml/h. Make sure that there is no light in the ROS to make sure that there is no light in it, and that the light intensity is the same as that in the solution, which is the same as that of the light intensity, the light intensity of the solution is the same as that of the NADPH. The intensity of light is 10 points, the intensity of light is low, and the intensity of light is low. On the other hand, the 1%NaCl signal is closed, the light intensity is low, and the light intensity is low once the light intensity is high. Tell him, tell him, tell him what to do, let him know, let him know. There is a typed version of the ROS that is released from the above.

项目成果

ダイズ幼根における細胞外活性酸素種のモニタリングデバイスの開発

大豆胚根细胞外活性氧监测装置的研制

• 发表时间: 2022
• 作者: Fukumi Junji;Matsuura Fuminori;Fukuda Koji;Yoshida Susumu;Iida Kenichi;稲葉雄哉・神保紀之・牧晋太郎・藤井紳一郎・安保充
• 通讯作者: 稲葉雄哉・神保紀之・牧晋太郎・藤井紳一郎・安保充