Investigation of stem cell niche in developing ruminal epithelial tissue

瘤胃上皮组织发育中干细胞生态位的研究

• 批准号: 21K05900
• 负责人: 鈴木 裕
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05900/
• 关键词: ウシ; ルーメン上皮細胞; 組織発達; 制御因子; 子牛; 反芻胃; 発達成長; 組織幹細胞

ウシの反芻胃（ルーメン）は離乳期をさかいに急速に発達するが、その細胞的・分子的な機序には不明な点が多い。本研究ではルーメン上皮基底層に局在する増殖細胞が、ルーメン組織の発達に直接的に関与すると考え、その増殖や分化を制御する組織内の微小環境（ニッチ）の存在を仮定して、その解明を目指した。本年度はレーザーマイクロダイセクション（LMD）により顕微分取した離乳後個体のルーメン基底細胞および上層細胞について、mRNA-seqによりトランスクリプトーム解析を行い、基底細胞の機能的特徴を把握すると同時に、それを調節するシグナル経路を検討した。前年度の行ったLMDではRNAが分解されていたが、組織切片の染色方法やRNase阻害剤の見直しにより、質・量ともにmRNA-seqが可能なRNAを抽出することが可能となった。mRNA-seqの結果から、基底細胞では細胞周期関連遺伝子の発現が高く、盛んな細胞増殖が起きていることが裏付けられた。基底細胞では細胞外マトリックスに関連する遺伝子が濃縮されており、特に細胞増殖をサポートするラミニン-インテグリン経路が検出された。免疫染色によりこれらの一部は基底細胞に局在することが確認された。また、上層細胞においては上皮の角質化に関与するTGFbが高発現しており、角質層形成への関与が示唆された。前年度の研究結果から、ルーメン上皮細胞の増殖を制御するニッチ因子としてラミニンや各種の成長因子が示唆されていたが、本年度のトランスクリプトーム解析によりそれが裏付けられた。次年度は培養ルーメン上皮細胞を用いて、これらのニッチ候補分子の直接的な生理作用を明らかにすることを目指す。

The ruminant stomach (ルーメン) is in the weaning period, and the structure of the weaning period is rapid, and the structure of the cells and molecules is unknown. In this study, the structure of the epithelial basal layer of the epithelium is directly related to the structure of the proliferating cells and the structure of the tissue.え, そのproliferation and differentiation をcontrol するThe existence of the micro-environment (ニッチ) within the organization を仮determination して, その解明をocular finger した. This year's LMD により顕differentiationしたPost-weaning individual basal cells およびupper cells について, mRN A-seq analysis of basal cells and functions of basal cells The special feature is to grasp the control at the same time and adjust the control at the same time. Previous year's analysis of LMD and RNA decomposition, tissue section staining method and RNase blocking agentの见直しにより、Quality・QuantityともにmRNA-seqがpossibleなRNAをExtractionすることがpossibleとなった. The result of mRNA-seq is clear, the basal cell cycle is related to the cell cycle, and the cell proliferation rate is high. Basal cell では extracellular マトリックスにassociated する伝子がcondensed されており, Special Cell Proliferation System. Immunostaining of the basal cells was confirmed by immunostaining.また、The epithelial epithelium of the upper layer is keratinized and the keratinization is high, and the cuticle is formed. The results of the previous year's research were various factors that control the proliferation of epithelial cells and control factors. The growth factor is the growth factor, and the current year's growth factor analysis is the growth factor. In the following year, the direct physiological effects of the direct physiological effects of the candidate molecules on the cultured epithelial cells were determined.

项目成果

子牛のルーメン組織発達における増殖細胞群の寄与

增殖细胞群对小牛瘤胃组织发育的贡献

• 发表时间: 2021
• 作者: Shimizu M;Sugino T;Isobe N;橋本苑子，福井えみ子，松本浩道;鈴木裕，林英明，芳賀聡，小池聡，小林泰男
• 通讯作者: 鈴木裕，林英明，芳賀聡，小池聡，小林泰男

ウシ反芻胃における幹細胞探索の試みと組織発達における役割

尝试在牛瘤胃中寻找干细胞及其在组织发育中的作用

• 发表时间: 2021
• 作者: Ruri Ohno;Yusaku Tsugami;Takahiro Nii;Yukinori Yoshimura;Ken Kobayashi;Naoki Isobe;橋本苑子，福井えみ子，松本浩道;鈴木裕
• 通讯作者: 鈴木裕