宿主細胞分子SLAM利用能を基にした鯨類モルビリウイルス感染拡大機序の解明

基于宿主细胞分子SLAM利用能力阐明鲸豚麻疹病毒感染传播机制

基本信息

批准号：
21K05929
负责人：
關文緒
金额：
$ 2.58万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05929/
关键词：
鯨類モルビリウイルス H タンパク質 SLAMF1 Hタンパク質 SLAM 受容体モルビリウイルス

项目摘要

流行を拡大しているdolphin morbillivirus (DMV)の特徴をSLAM利用能力から明らかにするために、他の鯨類モルビリウイルスとSLAM利用能力について比較を行った。dolphin morbillivirus (DMV)とporpoise morbillivirus(PMV)のそれぞれのHemagglutinin (H)タンパク質のSLAM結合部位を含むHタンパク質のC末端側のアミノ酸置換が利用能力の変化を生じており、PMV株ではモルビリウイルスで広く保持されている残基のアミノ酸置換が融合能力を変化させていた。本年度は、昨年度の研究を踏まえDMVの融合能力の上昇について解析を進めた。Dual split法を用いた細胞融合測定により、DMVのFusion (F)タンパク質はSLAM非依存性の細胞融合を生じることが明らかとなった。このことから、DMV Fタンパク質は強い細胞融合能力を持っており、DMV株の病原性への関与が推測される。また、本年度は国内海岸線に漂着した鯨類サンプルに対し鯨類モルビリウイルス感染の有無のスクリーニングを実施した。当初nested-RT-PCR法による検出を目指したが、real-time RT-PCR法による、より広い鯨類モルビリウイルス種を検出可能な方法が報告されたため、検出方法を変更して解析中である。また、Vero細胞にHAタグ融合イルカSLAMを発現させた細胞を用いて、ウイルス分離を試みた。今年度解析した検体ではウイルスは分離できず、海外流行株のような陽性検体は確認されていないが、日本近海における鯨類モルビリウイルス感染の広がりについて新たな知見が得られるように解析を進めている。

为了阐明日益增长的流行海豚病毒（DMV）的特征，从其猛烈的利用能力中，我们将其他鲸类菌丝病毒与SLAM利用能力进行了比较。 Amino acid substitutions on the C-terminus of the H protein containing the SLAM-binding site of the Hemagglutinin (H) proteins of dolphin morbillivirus (DMV) and porpoise morbillivirus (PMV) respectively caused changes in utilization ability, while amino acid substitutions of residues widely retained in morbilliviruses altered fusion ability in PMV strains.今年，我们根据去年的研究分析了DMV融合功能的增加。使用双分裂方法的细胞融合测量结果表明，DMV融合（F）蛋白会产生独立的细胞融合。这表明DMV F蛋白具有很强的细胞融合能力及其参与DMV菌株的致病性。此外，今年，我们筛选了鲸类样品在国内海岸线上冲上岸，以查看它们是否已感染了鲸类尸体病毒。最初，该公司旨在检测嵌套RT-PCR方法，但作为一种可以通过使用实时RT-PCR方法检测到更广泛的鲸类虫病病毒物种的方法，已更改检测方法并进行了分析。此外，使用在Vero细胞上表达标有HA标记的海豚大满贯的细胞尝试了病毒分离。今年分析的标本不允许隔离病毒，也没有证实诸如海外流行病菌株的阳性标本，但是正在进行分析以获取有关日本水域中鲸类麦芽菌病的传播的新知识。