宿主細胞分子SLAM利用能を基にした鯨類モルビリウイルス感染拡大機序の解明

点击翻译按钮获取中文摘要

流行を拡大しているdolphin morbillivirus (DMV)の特徴をSLAM利用能力から明らかにするために、他の鯨類モルビリウイルスとSLAM利用能力について比較を行った。dolphin morbillivirus (DMV)とporpoise morbillivirus(PMV)のそれぞれのHemagglutinin (H)タンパク質のSLAM結合部位を含むHタンパク質のC末端側のアミノ酸置換が利用能力の変化を生じており、PMV株ではモルビリウイルスで広く保持されている残基のアミノ酸置換が融合能力を変化させていた。本年度は、昨年度の研究を踏まえDMVの融合能力の上昇について解析を進めた。Dual split法を用いた細胞融合測定により、DMVのFusion (F)タンパク質はSLAM非依存性の細胞融合を生じることが明らかとなった。このことから、DMV Fタンパク質は強い細胞融合能力を持っており、DMV株の病原性への関与が推測される。また、本年度は国内海岸線に漂着した鯨類サンプルに対し鯨類モルビリウイルス感染の有無のスクリーニングを実施した。当初nested-RT-PCR法による検出を目指したが、real-time RT-PCR法による、より広い鯨類モルビリウイルス種を検出可能な方法が報告されたため、検出方法を変更して解析中である。また、Vero細胞にHAタグ融合イルカSLAMを発現させた細胞を用いて、ウイルス分離を試みた。今年度解析した検体ではウイルスは分離できず、海外流行株のような陽性検体は確認されていないが、日本近海における鯨類モルビリウイルス感染の広がりについて新たな知見が得られるように解析を進めている。