Complete elucidation of pathogenic mechanism of severe dengue in mouse model, developing the symptoms of vascular leakage induced by cytokine storm.

本研究ではデング出血熱マウスモデルを用いて、サイトカインストームによる重症化機序解明を目的にしている。なぜ免疫細胞の異常活性化が起こるか重症感染症においても明らかではない。我々はこれまである特定のT細胞集団から産生される物質が重要であることを明らかにした。このモデルではTNF-αやIL-17Aシグナルの阻害により症状が軽減され、致死率が劇的に改善されるが、本研究によりTNF-αやIL-17Aシグナル阻害効果は、転写レベルでの制御のためであることが明らかになっている。これまで全身のI型II型インターフェロンレセプターがノックアウト（IFN-RKO）されたマウスを用いていた。これはデングウイルスがマウスでほとんど増殖しないことによった。I型だけのIFN-EKOマウスでもデングウイルスは致死性を示さない。これまでの観察をさらに検証するためには、免疫状態がなるべく野生型マウスに近いものが必要になる。そこでデングウイルス臨床株をI型IFN-RKOマウスへ順化させ、これらマウスでも増殖し、致死性があるウイルスを得た。さらに観察を検証するために、免疫的により強いミエロイド系（骨髄系）の細胞だけのI型インターフェロンレセプターがノックアウトされているマウス（LysM Cre+Ifnarflox/floxマウス）を導入し、致死性を観察した。これは全く新規の系であり、より野生型に近いモデルの作成に成功した。馴化した2株のウイルス遺伝子にはれぞれ3-5カ所のアミノ酸置換を確認した。馴化ウイルスは骨髄での増殖能が上昇していた。さらにLysM Cre+Ifnarflox/floxマウスでは骨髄系細胞しか感染していないと予想され、骨髄系細胞への感染が病態進行に最重要なステップであると考えられた。

本研究ではデング出血熱マウスモデルを用いて、サイトカインストームによる重症化機序解明を目的にしている。なぜ免疫細胞の異常活性化が起こるか重症感染症においても明らかではない。我々はこれまである特定のT細胞集団から産生される物質が重要であることを明らかにした。このモデルではTNF-αやIL-17Aシグナルの阻害により症状が軽減され、致死率が劇的に改善されるが、本研究によりTNF-αやIL-17Aシグナル阻害効果は、転写レベルでの制御のためであることが明らかになっている。これまで全身のI型II型インターフェロンレセプターがノックアウト（IFN-RKO）されたマウスを用いていた。これはデングウイルスがマウスでほとんど増殖しないことによった。I型だけのIFN-EKOマウスでもデングウイルスは致死性を示さない。これまでの観察をさらに検証するためには、免疫状態がなるべく野生型マウスに近いものが必要になる。そこでデングウイルス臨床株をI型IFN-RKOマウスへ順化させ、これらマウスでも増殖し、致死性があるウイルスを得た。さらに観察を検証するために、免疫的により強いミエロイド系（骨髄系）の細胞だけのI型インターフェロンレセプターがノックアウトされているマウス（LysM Cre+Ifnarflox/floxマウス）を導入し、致死性を観察した。これは全く新規の系であり、より野生型に近いモデルの作成に成功した。馴化した2株のウイルス遺伝子にはれぞれ3-5カ所のアミノ酸置換を確認した。馴化ウイルスは骨髄での増殖能が上昇していた。さらにLysM Cre+Ifnarflox/floxマウスでは骨髄系細胞しか感染していないと予想され、骨髄系細胞への感染が病態進行に最重要なステップであると考えられた。