Complete elucidation of pathogenic mechanism of severe dengue in mouse model, developing the symptoms of vascular leakage induced by cytokine storm.

彻底阐明重症登革热小鼠模型的致病机制，出现细胞因子风暴引起的血管渗漏症状。

基本信息

批准号：
21K05981
负责人：
黒須剛
金额：
$ 2.66万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究ではデング出血熱マウスモデルを用いて、サイトカインストームによる重症化機序解明を目的にしている。なぜ免疫細胞の異常活性化が起こるか重症感染症においても明らかではない。我々はこれまである特定のT細胞集団から産生される物質が重要であることを明らかにした。このモデルではTNF-αやIL-17Aシグナルの阻害により症状が軽減され、致死率が劇的に改善されるが、本研究によりTNF-αやIL-17Aシグナル阻害効果は、転写レベルでの制御のためであることが明らかになっている。これまで全身のI型II型インターフェロンレセプターがノックアウト（IFN-RKO）されたマウスを用いていた。これはデングウイルスがマウスでほとんど増殖しないことによった。I型だけのIFN-EKOマウスでもデングウイルスは致死性を示さない。これまでの観察をさらに検証するためには、免疫状態がなるべく野生型マウスに近いものが必要になる。そこでデングウイルス臨床株をI型IFN-RKOマウスへ順化させ、これらマウスでも増殖し、致死性があるウイルスを得た。さらに観察を検証するために、免疫的により強いミエロイド系（骨髄系）の細胞だけのI型インターフェロンレセプターがノックアウトされているマウス（LysM Cre+Ifnarflox/floxマウス）を導入し、致死性を観察した。これは全く新規の系であり、より野生型に近いモデルの作成に成功した。馴化した2株のウイルス遺伝子にはれぞれ3-5カ所のアミノ酸置換を確認した。馴化ウイルスは骨髄での増殖能が上昇していた。さらにLysM Cre+Ifnarflox/floxマウスでは骨髄系細胞しか感染していないと予想され、骨髄系細胞への感染が病態進行に最重要なステップであると考えられた。

这项研究使用了登革热大量发烧的小鼠模型来阐明细胞因子风暴引起的严重程度机制。目前尚不清楚为什么在严重感染中发生免疫细胞异常激活。我们已经表明，先前指定的T细胞种群产生的物质很重要。在该模型中，对TNF-α和IL-17A信号的抑制作用可减少症状并大大提高死亡率，但这项研究表明，TNF-α和IL-17A信号的抑制作用是由于转录水平的调节所致。到目前为止，在将全身I-II干扰素受体撞倒（IFN-RKO）的情况下，使用了小鼠。这是由于以下事实：登革热病毒在小鼠中很少成倍增加。即使在IFN-EKO小鼠中，登革热病毒也不是致命的。为了进一步验证先前的观察结果，必须使免疫态尽可能接近野生型小鼠。因此，将临床登革热病毒菌株适应于I型IFN-RKO小鼠中，并且还种植了这些小鼠以获得致命的病毒。为了进一步验证该观察结果，仅将免疫促粒细胞（髓样）细胞被淘汰（Lysm CRE+ifnarflox/flox小鼠）的小鼠（lysm cre+ifnarflox/flox小鼠）引入了杀死性。这是一个全新的系统，我们成功地创建了一个更接近野生类型的模型。证实这两种适应的病毒基因在3-5个位置都有氨基酸取代。条件病毒具有增加骨髓中增殖的能力。此外，据预测，仅在Lysm CRE+IFNARFLOX/FLOX小鼠中感染髓样细胞，而髓样细胞的感染被认为是疾病进展中最重要的一步。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Chimeric flavivirus causes vascular leakage and bone marrow suppression in a mouse model

嵌合黄病毒在小鼠模型中引起血管渗漏和骨髓抑制

DOI：
10.1016/j.bbrc.2023.04.003
发表时间：
2023
期刊：
Biochem Biophys Res Commun .
影响因子：
0
作者：
Takeshi Kurosu;Keiko Hanabara;Azusa Asai;Sabar Pambudi;Supranee Phanthanawiboon;Magot Diata Omokoko;Yusuke Sakai;Tadaki Suzuki;Kazuyoshi Ikuta
通讯作者：
Kazuyoshi Ikuta

致死性デング出血熱マウスモデルを用いた高サイトカイン産生誘導による重症化機序の解明

使用致死性登革出血热小鼠模型阐明诱导高细胞因子产生引起的恶化机制

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
黒須剛;奥崎大介;下島昌幸;吉河智城;髙松由基;西條政幸
通讯作者：
西條政幸

致死性デング出血熱マウスモデルを用いたTNF-シグナル阻害による防御効果の分子機序解明

使用致死性登革出血热小鼠模型阐明 TNF 信号抑制保护作用的分子机制

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
黒須剛;奥崎大介;坂井祐介;Mohamad Al Kadi;下島昌幸;吉河智城;福士秀悦;永田典代;鈴木忠樹;海老原秀喜;西條政幸
通讯作者：
西條政幸

Interleukin-17A released from intestinal γδT cells induces cytokine storm in mice with severe dengue

肠γδT细胞释放的白细胞介素17A在患有严重登革热的小鼠中诱导细胞因子风暴

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takeshi Kurosu;Daisuke Okuzaki;Yusuke Sakai;Mohamad Al Kadi;Supranee Phanthanawiboon;Yasusi Ami;Masayuki Shimojima;Tomoki Yoshikawa;Shuetsu Fukushi;Noriyo Nagata;Tadaki Suzuki;Daisuke Kamimura;Masaaki Murakami;Hideki Ebihara;Masayuki Saijo
通讯作者：
Masayuki Saijo