RNP remodeling by RNA helicase UAP56

RNA解旋酶UAP56对RNP进行重构

• 批准号: 21K06016
• 负责人: 谷口 一郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University (2022)Kyoto University (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06016/
• 关键词: RNA核外輸送; RNP; RNP remodeling; RNA export; RNA helicase

真核細胞のmRNAは核内で合成された後、一群のRNA結合タンパク質とともにhnRNPと呼ばれる複合体を形成する。その後、核外輸送タンパク質因子群がmRNAに結合することによってmRNAは細胞質へ輸送される。mRNA核外輸送において、別種のU snRNAの核外輸送因子PHAXがmRNAに結合して、その結果、誤った経路で輸送される可能性が考えられた。我々は以前、PHAXのmRNA結合を防ぐ仕組みとして、hnRNP構成タンパク質因子であるhnRNPCのmRNAへの結合が重要であることを報告した。PHAXのmRNA結合の阻害後には、hnRNPCのmRNAからの解離がmRNA核外輸送に重要であることも示した。ただし、hnRNPCのmRNAからの解離の仕組みは不明である。当該年度では、解離の仕組みを明らかにする目的で、hnRNPCの活性に焦点を絞って解析を行った。スプリントライゲーション法を利用した試験管内RNA-タンパク質結合実験系を構築することによって、hnRNPCがmRNAの5'末端のキャップ構造から隙間なくRNAに結合すること、さらに、その結合にはキャップ結合タンパク質複合体CBCが必要であることを示した。また、アフリカツメガエル卵母細胞への顕微注入実験によって、生細胞においてhnRNPCの4量体形成がU snRNA核外輸送経路利用の抑制に重要であることを示した。以上の結果を国際雑誌Nucleic Acids Research誌で発表した。mRNA核外輸送とは対照的に、U snRNA核外輸送に関与するRNAヘリカーゼは未知である。これまでにUAP56を候補因子として同定していた。当該年度では、試験管内反応系を構築することにより、UAP56がATP依存的にPHAXのRNA結合を促進することがわかった。また、PHAXとUAP56を含む新規タンパク質複合体を同定した。

In eukaryotic cells の mRNA は nuclear で synthetic さ れ た after, a group of の rna-binding タ ン パ ク qualitative と と も に hnRNP と shout ば れ る complex を form す る. そ の, nucleus after conveying タ ン パ ク qualitative factor of が mRNA に combining す る こ と に よ っ て mRNA は cytoplasm へ conveying さ れ る. MRNA nucleus delivery に お い て, other の U snRNA の delivery outside the core factor PHAX が mRNA に combining し て, そ の results, mistakenly っ た で 経 road transportation さ れ る possibility が exam え ら れ た. And before I 々 は PHAX の mRNA combining を anti ぐ blackstone group み と し て, hnRNP タ ン パ ク qualitative factor で あ る hnRNPC の mRNA へ の combining が important で あ る こ と を report し た. PHAX の mRNA after combining の resistance against に は, hnRNPC の mRNA か ら の dissociation が mRNA nuclear transport に important で あ る こ と も shown し た. Youdaoplaceholder0 ただ, hnRNPC <e:1> mRNA ら ら ら dissociated <s:1> group み み unknown である. When the annual で は, dissociative の blackstone group み を Ming ら か に す る purpose で, hnRNPC の active に focus を ground っ て parsing line を っ た. ス プ リ ン ト ラ イ ゲ ー シ ョ ン を using し た test tube RNA - タ ン パ ク qualitative combined with be を 験 department building す る こ と に よ っ て, hnRNPC が mRNA の 5 'end の キ ャ ッ プ tectonic か ら interstitial な く RNA に combining す る こ と, さ ら に, そ の combining に は キ ャ ッ プ combining タ ン パ ク qualitative complex CBC が necessary で あ Youdaoplaceholder0 る とを shows た. ま た, ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル oocytes へ の 顕 micro injection be 験 に よ っ て, cell に お い て hnRNPC の 4 quantity body form が U snRNA nuclear conveying 経 road use の inhibit に important で あ る こ と を shown し た. The above <s:1> results are shown in the を international 雑 journal and the Nucleic Acids Research journal で, which also show the た. The に of mRNA exonuclear delivery と, the に of U snRNA exonuclear delivery に and the するRNAヘリカ ゼ ゼ ゼ ゼ である are unknown である. Youdaoplaceholder5 れまでにUAP56を candidate factor と て て same as <s:1> て た た た た. When the annual で は, test tube anti 応 を build す る こ と に よ り, UAP56 が ATP dependent に PHAX の rna-binding を promote す る こ と が わ か っ た. Youdaoplaceholder0, PHAXとUAP56を contains む new regulations タ パ パ the <s:1> mass complex を is determined to be た.

项目成果

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Searching for factors that remove hnRNP C from RNA

寻找从 RNA 中去除 hnRNP C 的因子

• 发表时间: 2022
• 作者: Ichiro Taniguchi;Mutsuhito Ohno
• 通讯作者: Mutsuhito Ohno