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エンドサイトーシス経路を基軸とした細胞内輸送経路の解明

基于内吞途径阐明细胞内转运途径

基本信息

批准号：
21K06087
负责人：
十島純子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokyo University of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本年度は以下の研究を実施した。（1）クラスリン小胞の初期エンドソームへの融合機構の解明、についてはラパマイシン誘導ヘテロ二量化を用いたPan1pの異所性発現の影響について実験を進めた。本年度の研究ではアクチン活性化因子や脱重合因子もPan1繋留部位に順番にリクルートされ、ここでエンドサイトーシス過程の後期過程が再現されることを明らかにした。さらに、クラスリン小胞のエンドソームへの輸送に必要なアクチンケーブルもPan1繋留部位に繋留されることを明らかにした。(2) ゴルジ体由来小胞とエンドソームの融合機構、についてはゴルジ体からの輸送経路を遮断した際のクラスリン小胞-エンドソーム間の融合に与える影響について、クラスリンアダプタータンパク質であるGGA2の機能ドメインを部分的に欠損する変異体を作成し、エンドサイトーシス経路の輸送への影響を調べた。その結果、他のクラスリンアダプタータンパク質との結合を仲介するGAEドメイン欠損体では、野生型や他のドメイン欠損体と比べて顕著なエンドサイトーシスの異常が見られた。また、リサイクル経路のマーカーであるSnc1p(R-SNARE)の局在を詳細に調べたところ、蛍光α-factorと同様にトランスゴルジ網内のTlg2pが局在する区画と共局在することが分かった。さらに、GGAs欠損体ではSnc1pはTlg2pと共にSec7pとは異なる部位に蓄積することが分かった。(３)エンドソームにおける積荷の分解とリサイクリングの選別機構、については脂質膜成分であるフォスファチジルセリン（PS）合成酵素の欠損体（cho1Δ）の解析を行った。その結果、cho1ΔではPSが著しく低下し蛍光α-factorの取り込み低下が見られた。これはα-factorの受容体であるSte2pの細胞膜局在の低下が原因であることを明らかにした。

This year, the following research has been carried out. (1) The initial stage of the development of the fusion mechanism of the cell, the analysis of the initial stage of the development of the fusion mechanism, the analysis of the initial stage of the fusion mechanism, the initial stage of the induction mechanism, the second quantization of the application of the Pan1p, the analysis of the impact of the initial stage of the fusion mechanism, the This year's research shows that the activation factor, the declination factor and the Pan1 residue are sequentially reproduced in the later stages of the process. In addition, the transportation of small cells is necessary to ensure the safety and stability of the system. (2)In order to improve the quality of GGA 2, the fusion mechanism of cell and end solution, the influence of the fusion between cell and end solution on the transmission path of cell and end solution, and the influence of the transmission path of end solution on the transmission path of GGA2 function are adjusted. As a result, the abnormal behavior of the GAE in the absence of loss, wild-type and other types of loss, and the abnormal behavior of the GAE in the absence of loss, is observed. Snc1p(R-SNARE) is a network of networks with a network of Tlg2p(R-SNARE). The GGAs are deficient in Snc1p, Tlg2p, Sec7p, and different in position. (3)Analysis of the degradation and separation of accumulated charge in the system, analysis of the degradation of lipid membrane components in the system (PS), and analysis of the degradation of enzyme (cho1Δ). As a result, cho1Δ PS The reason why the α-factor receptor is low