エンドサイトーシスにおけるクラスリン被覆小胞のエンドソームへの輸送機構の解析

网格蛋白包被的囊泡胞吞过程中向内体的转运机制分析

• 批准号: 06J40104
• 负责人: 十島 純子
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J40104/
• 关键词: エンドサイトーシス; アクチン細胞骨格; シグナル伝達; クラスリン; エンドソーム; 細胞内輸送; アクチン

本年度計画に沿って以下の研究を実施した。1つ目の研究課題である「エンドサイトーシスにおけるクラスリン被覆小胞とエンドソームの会合過程のリアルタイム解析」については、アクチンケーブルを介したクラスリン被覆小胞の輸送機構の解析を行なった。アクチンケーブルを介したクラスリン被覆小胞の輸送を制御している蛋白質を同定するために、エンドサイトーシス関連蛋白質、およびエンドソーム関連蛋白質をコードする、約300種類の遺伝子欠損変異体を作成した。これらの変異体を用いて、まずアクチンケーブルの動態に異常の見られる変異体をスクリーニングした結果、CAP1, CAP2, SAC6の遺伝子欠損変異体でいおいて、アクチンケーブルの異常が認められた。これらの中で、SAC6変異体において、クラスリン被覆小胞のエンドソームへの輸送効率が著しく低下していることが分かった。また、アクチンケーブルの重合因子であるForminの酵母ホモログであるBnilpのCAP1, CAP2, SAC6変異体における局在の解析を行い、これらの変異体においてBnilpの局在が変化していることを明らかにした。2つ目の研究課題である、「初期エンドソームのエンドサイトーシス部位への移動の分子メカニズムの解析」については、今回、初期エンドソームを特異的に標識するマーカーの作製を試みた。データーベース検索の結果より20種類程度のエンドソーム局在タンパク質を選び、それらにGFPを付加して発現させ、その共局を調べた。この結果、酵母Rab5ホモログであるYpt51pが一部、初期エンドソームに局在することを明らかにした。また、アクチン重合阻害剤で処理した細胞において、Ypt51-GFPで標識したエンドソームの移動速度が低下することを見出した。

This year's plan is based on the following research and implementation. 1. Research project of the project: "Essential rendezvous process of covered cells" Analysis of アルタイムについては, アクチンケーブルを Introduction したクラスリン のanalytical analysis of the transport mechanism of coated cells を行なった. Transmission of acrylic covered cells Control the protein を Same as the するために, エンドサイトーSugarin-related proteins, Sugaru-related proteins, and about 300 types of oligosaccharide-related proteins are made from different types of proteins.これらの変variantを用いて、まずアクチンケーブルのdynamic にdifferent长の见られる変variant をスクリーニングした results, CAP1, CAP2, SAC6's remaining body, the abnormal body, and the abnormal body recognition.これらの中で, SAC6 variant において, クラスリン coated cells のThe conveying efficiency of エンドソームへの is low and the efficiency is low.また、アクチンケーブルの coincident factor であるForminのyeast ホモログであるBnilpのCAP1, CAP2, SAC6 変 variant body に お け る Bureau in の analytic を row い, こ れ ら の 変 variant に お い て Bnilp の bureau in が変化 し て い る こ と を 明 ら か に し た. 2つ目のResearch Topicである、「Initial エンドソームのエンドサイトーシス PARTへのMOVING MOLECULE メカニ"ズムのANALYSIS"については, this chapter, early stage "エンドソームを" special にLOGO "するマーカーのproduction" みた.データーベース検SOのRESULTSより20 TYPES OF DEGREESのエンドソームbureau in タンパク性を选び, それらにGFPを发加して発行させ, その合bureau をadjusted べた. The result of この, the first part of yeast Rab5ホモログであるYpt51p, the initial stage of エンドソームに in することを明らかにした.また、アクチンCoincidence blocking agent processingしたcellにおいて、Ypt51-GFPでidentificationしたエンドソームのlower movement speedすることを见出した.

项目成果

出芽酵母における EH ドメインタンパク質によるエンドサイトーシスの制御機構の解析

酿酒酵母EH结构域蛋白内吞调控机制分析

• 发表时间: 2011
• 作者: 鈴木良平(4);柏熊竜太朗;古屋絵里;斎藤麻友;十島純子;十島二朗
• 通讯作者: 十島二朗

Na+/H+対向輸送体NHX1pの細胞内局在と細胞内小胞輸送における役割

Na+/H+逆向转运蛋白NHX1p的亚细胞定位及其在细胞内囊泡转运中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: 小島愛;十島純子;十島二朗
• 通讯作者: 十島二朗

エンドサイトーシスによる受容体シグナルの制御とがん

内吞作用和癌症对受体信号的调节

• 发表时间: 2010
• 期刊: 最新医学 vol.24
• 作者: 十島純子;十島二朗
• 通讯作者: 十島二朗

出芽酵母Rab5ホモログYpt51pの細胞内局在とエンドサトーシスにおける役割

芽殖酵母 Rab5 同源物 Ypt51p 的亚细胞定位及其在内吞作用中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: 佐藤祥史;十島純子;十島二朗
• 通讯作者: 十島二朗

Requirements for recru itment of a G protein-coupled recepto r to clathrin-coated pits in budding yeast.

芽殖酵母中网格蛋白包被的凹坑招募 G 蛋白偶联受体的要求。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Mol. Biol. Cell vol.20
• 作者: Junko Y. Toshima;Jun-ichi Nakanishi;Kensaku Mizuno;Jiro Toshima;Da vid G. Drubin
• 通讯作者: Da vid G. Drubin