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ER exit site構築のためのSec16-Sed4間の機能制御

Sec16 和 Sed4 之间用于 ER 出口站点构建的功能控制

基本信息

批准号：
21K06164
负责人：
依光朋宏
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06164/
关键词：
小胞体 COPII 膜曲率 ER exit site 小胞輸送

项目摘要

Sec12とSed4は小胞体膜タンパク質であり細胞質ドメインのアミノ酸配列に高い相同性を共有する。Sec12はCOPII小胞形成因子Sec16との相互作用せず、COPII小胞形成ドメインであるER Exit Site (ERES)に集積しない。一方、蛍光顕微鏡を用いたライブセルイメージングにより、Sec4はERESに集積し、その細胞質ドメインを介したSec16との相互作用がERESへの集積に必要であることを昨年度までに見出した。本年度はSed4はERES集積メカニズムをさらに調べるための実験を行なった。細胞質ドメインがSec12由来、それ以外のドメインがSed4由来であるキメラ変異体Sed4-12NはSec12と同様にERESには集積しない。Sed4-12NとSec16の相互作用の検証を行うと、予想された通り両タンパク質は相互作用を示さなかった。Sed4-12Nは小胞体のチューブやシートの縁といった膜曲率の高い領域に特異的に局在する。このような領域への局在をSec12は示さない。これらの結果からSed4はSec16との相互作用が失われた状況で小胞体膜の高曲率領域に局在する可能性を考えた。そこで昨年度作成したSed4相互作用部位を欠損するSec16変異体を発現する細胞を用いこの可能性の検証を行なった。予想通りこのSec16変異体発現細胞では野生型Sed4はSed4-12Nと同様の局在パターンを示した。Sed4-12Nはその特異的局在にSed4由来の小胞体内腔ドメインの働きが必要であるためその機能解析を行なった。Sed4は内腔ドメインを介して自己相互作用することを発見した。以上の結果から小胞体膜の特にチューブやシートの縁といった領域に局在するSed4がSec16と相互作用することでERESに集積されるというモデルを描くことができた。

Sec12, Sed4, membrane, membrane, cell membrane, acid, homology, homogeneity, similarity, homogeneity, similarity, similarity, Sec12, COPII cell forming factor, Sec16, interaction, COPII cell formation, ER Exit Site (ERES), cell formation, cell formation, cell formation, On the one hand, the light microphone is used to make sure that it is necessary to use the Sec4 ERES collection, the Sec16 cell to introduce the interaction, the ERES collection, the necessary information, and the data from last year. In this year's Sed4 ERES collection, we need to know that we are in the middle of this year. The origin of the Sec12, the origin of the Sed4, the body Sed4-12N Sec12 is the same as the ERES collection. Sed4-12N "Sec16" interaction is expected to show that the interaction does not exist. Sed4-12N small cell bodies are sensitive to membrane curvature in the field of high performance. Please tell me that the field office is showing you in the Sec12. The results show that the possibility of high curvature of small cell membrane is studied in the field of Sed4 Sec16 interaction. The Sed4 interaction site was made yesterday. The Sec16 interaction site is not good enough to show that it is possible to use the possibility. Try to figure out that the wild-type Sed4 Sed4-12N is the same as the wild type Sed4 in the same bureau. The location of Sed4-12N special device is the origin of Sed4. It is necessary to make sure that the machine is able to analyze the data. The Sed4 interacts with each other in the lumen. The above results show that the microsomal membrane is characterized by Sed4 Sec16 interaction and ERES interaction.