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ER exit site構築のためのSec16-Sed4間の機能制御

Sec16 和 Sed4 之间用于 ER 出口站点构建的功能控制

基本信息

批准号：
21K06164
负责人：
依光朋宏
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06164/
关键词：
小胞体 COPII 膜曲率 ER exit site 小胞輸送

项目摘要

Sec12とSed4は小胞体膜タンパク質であり細胞質ドメインのアミノ酸配列に高い相同性を共有する。Sec12はCOPII小胞形成因子Sec16との相互作用せず、COPII小胞形成ドメインであるER Exit Site (ERES)に集積しない。一方、蛍光顕微鏡を用いたライブセルイメージングにより、Sec4はERESに集積し、その細胞質ドメインを介したSec16との相互作用がERESへの集積に必要であることを昨年度までに見出した。本年度はSed4はERES集積メカニズムをさらに調べるための実験を行なった。細胞質ドメインがSec12由来、それ以外のドメインがSed4由来であるキメラ変異体Sed4-12NはSec12と同様にERESには集積しない。Sed4-12NとSec16の相互作用の検証を行うと、予想された通り両タンパク質は相互作用を示さなかった。Sed4-12Nは小胞体のチューブやシートの縁といった膜曲率の高い領域に特異的に局在する。このような領域への局在をSec12は示さない。これらの結果からSed4はSec16との相互作用が失われた状況で小胞体膜の高曲率領域に局在する可能性を考えた。そこで昨年度作成したSed4相互作用部位を欠損するSec16変異体を発現する細胞を用いこの可能性の検証を行なった。予想通りこのSec16変異体発現細胞では野生型Sed4はSed4-12Nと同様の局在パターンを示した。Sed4-12Nはその特異的局在にSed4由来の小胞体内腔ドメインの働きが必要であるためその機能解析を行なった。Sed4は内腔ドメインを介して自己相互作用することを発見した。以上の結果から小胞体膜の特にチューブやシートの縁といった領域に局在するSed4がSec16と相互作用することでERESに集積されるというモデルを描くことができた。

Sec12 and Sed4 share a high degree of identity in the cytoplasm and in the acid alignment. Sec12 interacts with COPII cell forming factor Sec16 and accumulates at ER Exit Site (ERES). The interaction between ERES and the cytoplasm of the cells was necessary for the accumulation of ERES. This year's ERES collection is scheduled to be completed in September 2013. Cytoplasm is derived from Sec12 and from Sed4. Cytoplasm is derived from Sec 4-12 and from Sed 4 - 12. Cytoplasm is derived from Sec 12 and from Sed4-12. Cytoplasm is derived from Sec12 and from Sed 4. Cytoplasm is derived from Sec12. Cytoplasm is derived from Sec The interaction between Sed4-12N and Sec16 is demonstrated by the interaction between Sed4- 12 N and Sec 16 Sed4-12N is a small cell with a high membrane curvature and a specific location. This is the first time that a person has been arrested in Sec12. The result is that the interaction between Sed4 and Sec16 is lost, and the possibility of high curvature field of small cell membrane is examined. This is the first time that we've done this. The wild type Sed4-12N and the same type Sed4-12N were identified. Sed4-12N is a special part of Sed4. It is necessary to analyze the function of Sed4 Sed4 is the first to interact with each other. The above results show that the cell membrane has a special shape and shape, and the cell membrane has a special shape and shape.