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Na^+駆動型細菌べん毛モーターの回転機構

Na^+驱动细菌鞭毛马达的旋转机制

基本信息

批准号：
00J04274
负责人：
依光朋宏
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

V.alginolyticusのNa^+駆動型べん毛モーターのトルク発生には回転子であるFliGと固定子であるPomAの相互作用が必要であると考えられている。H^+駆動型モーターではPomAの相同因子MotAの荷電アミノ酸残基と回転子構成因子FliGの荷電残基間での静電的相互作用がトルク発生に関与しているというモデルが提唱されている。これらの残基はNa^+駆動型べん毛モーターのPomA、FliGにも保存されているが、これまでに私はPomAの荷電残基はトルク発生に必須ではないことを示した。そこでNa^+駆動型べん毛モーターFliGの荷電残基への変異導入を行い、トルク発生モデルのさらなる検証を試みた。FliGのK284、R301、D308、D309、R317をそれぞれAlaに置換した。大腸菌FliGの場合と同様に、変異をそれぞれ単独で持つFliGを発現している菌体は運動能を保持していた。次にこれらの変異を組み合わせ二重変異をPomAに導入したが大腸菌FliGで完全に機能を失うR301A/D308A、R301A/D309Aだけでなくすべての二重変異FliGを発現する菌体が野生型と同レベルの遊泳能を保持した。大腸菌FliGで静電的相互作用に関わる最小単位であると推定されいる3つの残基に関する変異体R301A/D308A/D309A、R301A/D309N/D309Nでもswarm能の低下は見られたが遊泳能は野生型と同レベルであった。以上の結果より、共通であると考えられていたH^+駆動型べん毛モーターとNa^+駆動型モーターのトルク発生機構であるが、H^+駆動型モーターの回転子の推定トルク発生領域中の荷電残基がNa^+駆動型モーターではトルク発生に必須ではないことが示唆された。

V.alginolyticus Na^+ motion-type H^+-motion-type interaction between charged acid residues of the same factor MotA of PomA and charged acid residues of the constituent factor FliG These residues are Na^+-activated, Pom A, FliG, Pom A, Pom A and Pom A. The introduction of different charged residues in the Na^+-activated FliG molecule was investigated. K284, R301, D308, D309, R317 of FliG are replaced by Ala. In the case of Escherichia coli FliG, different species are present, and the cell motility is maintained. In addition, the mutant FliG of E. coli was introduced into R301A/D308A and R301A/D309A, and the mutant FliG of E. coli was completely lost. The swimming ability of the wild type FliG was maintained. E. coli FliG electrostatic interaction is related to the minimum single position, the putative three residues are related to the mutant R301A/D308A/D309A, R301A/D309N and the low swarm energy is related to the wild type. The above results are common to all the charged residues in the H^+ motion-type cyclogenesis domain and Na ^+ motion-type cyclogenesis domain.