ATTRアミロイドーシスの加齢依存的な発症を制御する環境要因の同定

确定控制 ATTR 淀粉样变性年龄依赖性发病的环境因素

• 批准号: 21K06529
• 负责人: 佐藤 卓史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06529/
• 关键词: トランスサイレチン; レドックス; 線虫; アミロイドーシス

ATTRアミロイドーシスは野生型および変異型トランスサイレチン（TTR）が加齢に伴いアミロイド線維を形成して発症する難治性疾患であるが、加齢がどのようなメカニズムで発症に影響を及ぼすかは不明である。本研究では、細胞外環境の酸化還元（レドックス）バランス変化がATTRアミロイドーシスの加齢依存的な発症を制御するか線虫をモデル生物として明らかにすることした。申請者は、TTR単量体間での変性依存的なジスルフィド結合形成による二量体化がアミロイド形成の律速段階となることを発見している。本年度は、蛍光タンパク質融合TTRを発現するトランスジェニック線虫を作製して、TTR凝集体形成評価および寿命解析を行った。作製したトランスジェニック線虫の蛍光観察により、蛍光タンパク質融合TTRはドット状の凝集体として加齢依存的に蓄積することが明らかになった。また、ジスルフィド結合形成を阻害するためにシステイン残基に変異を導入した蛍光タンパク質融合TTRを発現するトランスジェニック線虫では、加齢依存的なTTR凝集体の蓄積は観察されなかった。次に、TTR凝集体の蓄積による線虫寿命への影響を検討したところ、TTRのシステイン残基の有無により寿命は異なり、システイン残基を有するTTR発現線虫では寿命短縮が観察された。したがって、線虫では加齢に伴いTTR単量体がジスルフィド結合を形成して二量体となり、凝集体として蓄積することで毒性を発揮することが示唆された。さらに本結果を精査するために、線虫の体内で生じるジスルフィド結合TTR二量体を可視化するNanoLuc Binary Technology (NanoBiT) システムを導入したトランスジェニック線虫の作製を行った。

ATTR is resistant to wild-type and heterotypic disease (TTR) and is associated with increased disease development. This study aims to control the development of ATTR dependent diseases by transforming the acidification of the outer cell environment. The applicant is interested in the discovery of the relationship between TTR units and the formation of a two-dimensional relationship between TTR units. This year, we conducted research on TTR development, TTR aggregate formation evaluation and life analysis. For example, if the concentration of TTR is increased, the concentration of TTR is increased. The accumulation of TTR aggregates was observed in the presence of TTR aggregates, which are dependent on the presence of TTR. In addition, the accumulation of TTR aggregates and the effect of life span on TTR development were investigated. The presence or absence of TTR residues and the difference in life span of TTR development were observed. In addition to TTR, the parasite also forms a two-dimensional complex and accumulates toxic substances. The results of this study were reviewed in detail. NanoLuc Binary Technology (NanoBiT) was introduced to visualize the in vivo growth of worms and TTR binary systems.

项目成果

レドックス環境変化によるATTRアミロイドーシス発症制御機構の解明

阐明通过改变氧化还原环境控制 ATTR 淀粉样变性发病的机制

• 发表时间: 2021
• 作者: 青木駿典;金沢貴憲;吉田圭輝;飯岡真吾;照喜名孝之;東顕二郎;近藤啓;稲田祐貴，佐々木亮子，小野祐一朗，山下拓真，小橋川敬博，鬼木健太郎，猿渡淳二，山中邦俊，首藤 剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史
• 通讯作者: 稲田祐貴，佐々木亮子，小野祐一朗，山下拓真，小橋川敬博，鬼木健太郎，猿渡淳二，山中邦俊，首藤 剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史

細胞外プロテオスタシスにおけるレドックス制御とタンパク質凝集との関連解析

细胞外蛋白质稳态中氧化还原控制与蛋白质聚集的关系分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 佐藤 卓史;稲田 祐貴;小橋川 敬博;森岡 弘志
• 通讯作者: 森岡 弘志

トランスサイレチンに唯一存在するシステイン残基への変異が構造安定性に及ぼす影響とその機構の解析

转甲状腺素蛋白唯一半胱氨酸残基突变对结构稳定性的影响及其机制分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 中村照也;小野祐一朗，稲田祐貴，小橋川敬博，首藤剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史
• 通讯作者: 小野祐一朗，稲田祐貴，小橋川敬博，首藤剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史

レドックスバランス変化による加齢依存性ATTRアミロイドーシスの発症制御機構の解析

氧化还原平衡变化控制年龄依赖性 ATTR 淀粉样变性发病的机制分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 飯岡真吾;金沢貴憲;藏野匠;小菅康弘;鈴木豊史;近藤啓;岡部航太郎;稲田祐貴，佐々木亮子，小野祐一朗，小橋川敬博，野井健太郎，首藤 剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史
• 通讯作者: 稲田祐貴，佐々木亮子，小野祐一朗，小橋川敬博，野井健太郎，首藤 剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史

トランスサイレチンに唯一存在するシステイン残基への変異がアミロイド形成を制御する ～核磁気共鳴法と分子動力学計算による解析～

转甲状腺素蛋白中唯一的半胱氨酸残基的突变控制淀粉样蛋白的形成〜利用核磁共振和分子动力学计算进行分析〜

• 发表时间: 2021
• 作者: 尾熊貴之;金沢貴憲;茨木ひさ子;高島由季;近藤啓;小野祐一朗，稲田祐貴，小橋川敬博，首藤剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史
• 通讯作者: 小野祐一朗，稲田祐貴，小橋川敬博，首藤剛，甲斐広文，森岡弘志，佐藤卓史