感音性難聴発症の病態メカニズム解明を目指した内耳蝸牛細胞保護システムに関する研究

内耳耳蜗细胞保护系统研究旨在阐明感音神经性听力损失发病的病理机制

• 批准号: 21K06589
• 负责人: 米山 雅紀
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Setsunan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06589/
• 关键词: 難聴; オートファジー; 外らせん溝細胞; 騒音性難聴; 蝸牛らせん靱帯; 感音性難聴; 蝸牛外側壁; 細胞保護システム

【目的】本研究では、音刺激に対する蝸牛内でのオートファジーによる細胞保護機構を明らかにするために音響性難聴誘発モデルマウスを用いて、音響曝露したマウスの聴力に対するオートファジー阻害薬であるクロロキン（CQ）あるいはオートファジー活性化薬であるラパマイシンの影響について解析した。【方法】5週齢Std-ddY 系雄性マウスに8 kHz、90 dBあるいは110 dBの音刺激を1時間曝露した後、各周波数(4、12および20 kHz)について聴性脳幹反応(ABR)を指標に聴力を測定した。CQ（40 mM）は90 dBの音刺激1時間前にマウス蝸牛内正円窓に1時間留置し、蝸牛内に浸透させた。一方、ラパマイシン（0.5 mM）は110 dBの音刺激24時間前にマウス左耳後部を切開し、骨胞を開放して露出させた蝸牛正円窓上部にラパマイシンを浸透させた止血用ゼラチンスポンジを留置し蝸牛内に浸透させた。また、110 dBの音響縛したマウスから蝸牛切片を作成してLC3(オートファジーマーカー)およびSLC26A4（外らせん溝細胞マーカー）に対する抗体を用いて免疫組織化学法により解析した。【結果】マウスの聴力に対する薬物処置の影響をABRにより解析したところ、90 dB音響曝露を行ったものでは、対照群で聴力に変化はみられなかったが、CQ処置は90 dB音響曝露後の聴力を有意に悪化させた。一方、110 dBの音響曝露はマウスの聴力を著明に悪化させるが、ラパマイシン処置は、この聴力悪化を有意に抑制した。免疫組織化学法の結果、110 dB音響曝露後の蝸牛では、LC3とSLC26A4両抗体陽性細胞が認められ、その発現は完全に一致した。【考察】以上の結果から、蝸牛外らせん溝細胞にはオートファジーによる細胞保護機構が存在し、外部からの音刺激に対して聴覚機能を維持する重要な役割をもつ可能性が示唆される。

[objective] this study で は, sound stimulus に す seaborne る snail inside で の オ ー ト フ ァ ジ ー に よ る cell protection agency を Ming ら か に す る た め に sound sex difficult 聴 発 lure モ デ ル マ ウ ス を with い て, sound exposure し た マ ウ ス の 聴 force に す seaborne る オ ー ト フ ァ ジ ー resistance against 薬 で あ る ク ロ ロ キ ン (CQ) あ る い は オ ー ト フ ァ ジ ー activeness 薬 で Youdaoplaceholder0, あるラパ シ, シ, シ, て, impact に, て, て, て, た. 【 method 】 5 weeks 齢 Std - ddY male マ ウ ス に 8 kHz, 90 dB あ る い は 110 dB の sound stimulus を 1 time exposure し た after, each cycle number (4, 12 お よ び 20 kHz) に つ い て 聴 sex 脳 dry against 応 (ABR) を index に measure を 聴 forces し た. CQ (40 mM) ウス 90 dB <s:1> sound stimulation 1 time in advance に ウス ウス in the snail 窓に1 time retention <s:1> in the snail に immersion させた. Side, ラ パ マ イ シ ン (0.5 mM) 110 dB の は sound stimulus before 24 time に マ ウ ス left ear hind を cut open し, bone cell を し て reveal さ せ た snails are has drifted back towards &yen; upper 窓 に ラ パ マ イ シ ン を soak さ せ た hemostasis with ゼ ラ チ ン ス ポ ン ジ を lien し snail inside に soak さ せ た. ま た, 110 dB の acoustics bound し た マ ウ ス か ら snail slice を made し て LC3 (オ ー ト フ ァ ジ ー マ ー カ ー) お よ び SLC26A4 (outside ら せ ん ditch cells マ ー カ ー) に す seaborne を る antibody with い て immune histochemical methods に よ り parsing し た. 【 results 】 マ ウ ス の 聴 force に す seaborne る 薬 content 処 buy の influence を ABR に よ り parsing し た と こ ろ line, 90 dB sound exposure を っ た も の で は, according to the group of seaborne で に 聴 force - the は み ら れ な か っ た が, CQ 処 buy は after 90 dB sound exposure の 聴 force を intentionally に 悪 change さ せ た. Side, 110 dB の sound exposure は マ ウ ス の 聴 force を zhao Ming に 悪 change さ せ る が, ラ パ マ イ シ ン 処 buy は, こ の 悪 聴 force change を intentionally に inhibit し た. The results of immunohistochemistry <s:1>, after 110 dB exposure to sound, showed that the <s:1> snail で, LC3とSLC26A4 antibody positive cells が recognized められ and そ <s:1> were completely に consistent with each other in た た. [investigation] の above results か ら, snails outside ら せ ん ditch cells に は オ ー ト フ ァ ジ ー に よ る cell protection agency が し, external か ら の sound stimulus に し seaborne て hearing function を maintain す る important cut を な service も が つ possibility in stopping さ れ る.

项目成果

離乳後のクロホスファミドの急性適応が成体期のストレス反応性および海馬神経幹・前駆細胞の増殖能に与える影響

断奶后氯磷酰胺急性适应对成年期应激反应及海马神经干细胞和祖细胞增殖能力的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 尾中勇祐;山口太郎;米山雅紀
• 通讯作者: 米山雅紀

強大音響曝露に対する蝸牛内オートファジー活性化による外らせん溝細胞の役割

外螺旋沟细胞在响应强烈声音暴露的耳蜗自噬激活中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 中谷公紀;米山雅紀;山口太郎;尾中勇祐
• 通讯作者: 尾中勇祐

ニューロン障害後の海馬歯状回神経系幹・前駆細胞の増殖にグルタチオンが関与する

谷胱甘肽参与神经元损伤后海马齿状回神经系统干细胞和祖细胞的增殖

• 发表时间: 2022
• 作者: 米山雅紀;林里紗;山口太郎;尾中勇祐
• 通讯作者: 尾中勇祐

質量分析イメージングを用いたメトホルミン全身投与後の内耳内分布の可視化

使用质谱成像显示全身施用二甲双胍后内耳内的分布

• 发表时间: 2022
• 作者: 山口 太郎;喜多 知子;坂本 達則;三輪 徹;尾中 勇祐;米山雅紀
• 通讯作者: 米山雅紀

ミノサイクリンは腫瘍切除マウスで認められるうつ様行動および海馬ミクログリアの形態変化を改善する。

米诺环素可改善肿瘤切除小鼠中观察到的抑郁样行为和海马小胶质细胞的形态变化。

• 发表时间: 2022
• 作者: 11.尾中勇祐;山口太郎;新谷紀人;橋本均;米山雅紀
• 通讯作者: 米山雅紀