Development of new Na,K-ATPase inhibitor and the study of its reaction mechanism

新型Na,K-ATP酶抑制剂的研制及其反应机理研究

• 批准号: 21K06611
• 负责人: 鈴木 邦明
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06611/
• 关键词: Neuro-2a細胞; HEK細胞; Na,K-ATPase; Ca-ATPase; H,K-ATPase; aplysiallene; サブタイプ選択的阻害作用; 阻害薬; laurenidificin; ouabain; digitalis

研究分担者は(+)-laurenidificin、(-)-aplysiallene、(±)-aplysiallene、ブロモジエン部分の幾何異性体である(-)-及び(±)-bromodiene isomerを合成し、研究代表者に提供した。研究代表者は、これらの物質のラット及びウサギの脳Na,K-ATPaseに対する作用を解析して、既知の阻害薬であるouabainやbufadienolides作用と比較した。これらの結果を論文にまとめて公表する予定である。研究分担者は、上記の物質の合成以外に、H,K-ATPase阻害作用のあるminimiflorinの化学合成を開始した。H,K-ATPase阻害作用のある物質は、同じタイプのATPaseであるNa,K-ATPase活性も抑制する可能性が高く、Na,K-ATPase活性の調節に使用できる可能性があるからである。研究代表者は、合成物質の細胞毒性を検討するために神経系の細胞であるNeuro-2a細胞と、腎臓系の細胞であるHEK293細胞の培養を開始し、細胞数の計測から細胞毒性を解析する系を準備した。また、MTTアッセイにより毒性を解析する準備を行った。研究代表者は、サブタイプの異なるNa,K-ATPaseに対する合成物質の作用を検討するために、培養したNeuro-2a細胞とHEK293細胞を回収して、遠心分離操作によりミクロソーム分画を得た。Na,K-ATPase活性はミクロソーム分画に回収された。また、Na,K-ATPaseに近いP型ATPaseであるCa-ATPase活性もミクロソーム分画に存在した。今後、ミクロソーム分画を用いて、合成物質の各ATPaseに対する作用を解析することが可能となった。

Study share は (+) - laurenidificin, (-) - aplysiallene, (+) - aplysiallene, ブ ロ モ ジ エ ン の geometric straight body で あ る (-) - and び (+) - bromodiene isomer を synthetic し representatives, research に provide し た. Research representatives は, こ れ ら の material の ラ ッ ト and び ウ サ ギ の 脳 Na, K - ATPase に す seaborne る role を parsing し て, both know の resistance against 薬 で あ る ouabain や bufadienolides role と compare し た. Youdaoplaceholder0 れら the results of the を paper にまとめて public table する are determined to be である. In addition to the synthesis of the above-mentioned <s:1> substance <e:1>, に, H,K-ATPase inhibitory effect <s:1> あるminimiflorin <e:1> chemical synthesis を begins た た. H, K - ATPase resistance against role の あ は る substance, with じ タ イ プ の ATPase で あ る Na, K - ATPase activity も inhibit す る high possibility が く, Na, K - ATPase activity の adjusted に で き る possibility が あ る か ら で あ る. Research representatives は poisonous to the cells, synthetic の を beg す 検 る た め に god 経 cell の で あ る と Neuro - 2 a cell is crucial, renal cell の で あ る HEK293 cells の を start し, several の measuring か ら cytotoxicity を parsing す を る department prepare し た. Youdaoplaceholder0, MTTアッセ によ によ <s:1> toxicity を analysis する preparation を line った. Research representatives は, サ ブ タ イ プ の different な る Na, K - ATPase に す seaborne る synthetic の role を beg す 検 る た め に, cultivating し た と Neuro - 2 a cell HEK293 cells を back 収 し て, telecentric separation operation に よ り ミ ク ロ ソ ー ム points draw を た. The activity of Na,K-ATPase is ロソ ロソ ロソ ム divided into に and resold された. ま た, Na, K - ATPase に nearly い p-type ATPase で あ る Ca - ATPase activity も ミ ク ロ ソ ー ム existence painting に し た. In the future, ミ ク ロ ソ ー ム points を used い て, synthetic の ATPase に す seaborne る role を parsing す る こ と が may と な っ た.

项目成果

Reversible inhibition of Ca2+- or Mg2+-dependent ATPase activity in the rat brain by local anesthetics

局麻药对大鼠脑内 Ca2 或 Mg2 依赖性 ATP 酶活性的可逆抑制

• 发表时间: 2022
• 期刊: 北海道歯学雑誌
• 作者: Iwamoto Rie;Suzuki Kuniaki;Hase Yuri;Shibuya Makiko;Kimura Yukifumi;Fujisawa Toshiaki
• 通讯作者: Fujisawa Toshiaki

Mg，Ca及びZnのヒトアルカリ性ホスファターゼ活性に対する作用

镁、钙、锌对人体碱性磷酸酶活性的影响

• 发表时间: 2022
• 期刊: 北海道歯学雑誌
• 作者: Toba Hiroe;Ikemoto Mitsushi J.;Kobara Miyuki;Nakata Tetsuo;半谷 純一，鈴木 邦明，吉村 善隆，南川 元，兼平 孝，本多 丘人
• 通讯作者: 半谷 純一，鈴木 邦明，吉村 善隆，南川 元，兼平 孝，本多 丘人

口腔がん細胞のシスプラチン耐性化に伴う白金系抗がん剤及び強心配糖体に対する感受性の変化

口腔癌细胞对顺铂耐药导致铂类抗癌药物和强心苷敏感性发生变化

• 发表时间: 2022
• 期刊: 北海道歯学雑誌
• 作者: 石村菜穂子;江田諒太郎;鈴木仁人;小島史章;北里英郎;前花祥太郎.;義達 理恵子，鈴木 邦明，吉村 善隆，南川 元，鄭 漢忠
• 通讯作者: 義達 理恵子，鈴木 邦明，吉村 善隆，南川 元，鄭 漢忠