Determination of cell type(s) in which DLG1 exerts its role during the cardiovascular formation.

細胞内極性因子として知られるDLG1蛋白質の遺伝子欠損マウスは、高率に先天性心奇形を発症する。本研究は、心臓、とくに心臓流出路の発生におけるDLG1の機能を、細胞系譜特異的Dlg1遺伝子ノックアウトマウスを用いて解明することを目的としている。心臓流出路は、神経堤（NC)に由来する細胞と、二次心臓領域（SHF)に由来する細胞によって構成され、発生過程では両系譜細胞間の相互作用が必要である。一方、遺伝子レベルでは、どちらかの系譜での発現だけが流出路発生に必要な遺伝子の例も報告されている。本研究では、それぞれの細胞系譜で特異的にDlg1遺伝子を欠損するマウスを作製し、２つの細胞系譜におけるDlg1欠損が、心奇形発症にそれぞれどの程度寄与するのかを明らかにし、その結果を基に、各細胞系譜のDlg1機能や、各細胞系譜の発生の相関関係について解析する計画である。本年度（2022年度）は、Mef2c-AHF-Creトランスジーンを用いてSHF特異的Dlg1欠損マウス（Mef2cCre:Dlg1 cKO）およびSHF蛍光標識正常マウス（Mef2cCre:tdTomatoマウス）、Wnt1-Creトランスジーンを用いてNC特異的Dlg1欠損マウス（Wnt1Cre:Dlg1 cKO）およびNC蛍光標識正常マウス（Wnt1Cre:tdTomatoマウス）のサンプル採取と解析を開始した。予備的な観察では、Mef2cCre:Dlg1 cKOマウスは生後も生存可能であり、Dlg1 KOマウスにみられる周生期全例での致死性は、 Wnt1Cre:Dlg1 cKOマウスのみで観察された。またいずれのcKOマウスにおいても、心奇形発症率はDlg1 KOマウスよりも低くまた軽微な傾向が見られる。今後各マウスでのDLG1発現量の検証なども加え、各系譜でのDLG1機能をさらに追究していきたい。

細胞内極性因子として知られるDLG1蛋白質の遺伝子欠損マウスは、高率に先天性心奇形を発症する。本研究は、心臓、とくに心臓流出路の発生におけるDLG1の機能を、細胞系譜特異的Dlg1遺伝子ノックアウトマウスを用いて解明することを目的としている。心臓流出路は、神経堤（NC)に由来する細胞と、二次心臓領域（SHF)に由来する細胞によって構成され、発生過程では両系譜細胞間の相互作用が必要である。一方、遺伝子レベルでは、どちらかの系譜での発現だけが流出路発生に必要な遺伝子の例も報告されている。本研究では、それぞれの細胞系譜で特異的にDlg1遺伝子を欠損するマウスを作製し、２つの細胞系譜におけるDlg1欠損が、心奇形発症にそれぞれどの程度寄与するのかを明らかにし、その結果を基に、各細胞系譜のDlg1機能や、各細胞系譜の発生の相関関係について解析する計画である。本年度（2022年度）は、Mef2c-AHF-Creトランスジーンを用いてSHF特異的Dlg1欠損マウス（Mef2cCre:Dlg1 cKO）およびSHF蛍光標識正常マウス（Mef2cCre:tdTomatoマウス）、Wnt1-Creトランスジーンを用いてNC特異的Dlg1欠損マウス（Wnt1Cre:Dlg1 cKO）およびNC蛍光標識正常マウス（Wnt1Cre:tdTomatoマウス）のサンプル採取と解析を開始した。予備的な観察では、Mef2cCre:Dlg1 cKOマウスは生後も生存可能であり、Dlg1 KOマウスにみられる周生期全例での致死性は、 Wnt1Cre:Dlg1 cKOマウスのみで観察された。またいずれのcKOマウスにおいても、心奇形発症率はDlg1 KOマウスよりも低くまた軽微な傾向が見られる。今後各マウスでのDLG1発現量の検証なども加え、各系譜でのDLG1機能をさらに追究していきたい。