Elucidation of molecular mechanism that endocrine secretory granule biogenesis
阐明内分泌颗粒生物发生的分子机制
基本信息
- 批准号:21K06742
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
内分泌顆粒形成におけるマスター遺伝子を明らかにする目的で、前年度に構築したマスター遺伝子候補(INSM1およびMYT1L)の発現ベクターを非神経内分泌系である肺大細胞癌株H1299に導入し、導入の是非をウエスタンブロット法により確認した。導入株においてINSM1の恒常的な発現が確認された一方、MYT1Lの発現は確認されなかった。この現象はH1299以外の細胞株においても同様に認められた。MYT1L発現ベクターは、培養細胞株に一過性に導入した際には機能したことから、MYT1Lの恒常的な発現が細胞株の生存等にとって好ましくない影響をもたらす可能性が考えられた。そこでまずは、INSM1を導入したH1299(H1299-INSM1)を用いて解析を進めた。H1299-INSM1における内分泌顆粒関連遺伝子の発現をqRT-PCR法により解析した結果、内分泌顆粒関連遺伝子はINSM1によっては直接的に誘導されなかった。INSM1は神経内分泌特異的な分化誘導因子である一方、内分泌顆粒の形成には深く関与しない可能性が示された点は有意義である。上記の実験に並行して、顆粒内容物の融通性についての解析を進めた。前年度に作製したカルシトニン(CALCAv1遺伝子)発現ベクターに加えて、抗利尿ホルモン(AVP遺伝子)発現ベクターを構築し、H1299細胞に導入した。それら導入株について超微形態学的解析を行ったところ、REST抑制に加えてPROX1を導入し、さらにCALCAv1ないしはAVP遺伝子を導入したH1299において、内分泌顆粒と考えられる構造物が確認された。現在この結果を裏付けるデータを収集中であるが、この結果は、培養細胞株に人為的に内分泌顆粒を形成する過程において、内分泌顆粒に含有されるタンパクとしては、そのホルモンの種類は問わない可能性が示された。
Endocrine particles formed に お け る マ ス タ ー heritage 伝 son を Ming ら か に す る purpose で, annual に before constructing し た マ ス タ ー heritage 伝 son alternate (INSM1 お よ び MYT1L) の 発 now ベ ク タ ー を not god 経 endocrine system で あ る H1299 lung large cell carcinoma strain に import し, import の is を ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト method に よ り confirm し た. The imported strain にお にお てINSM1 <s:1> constant な occurrence が confirmation された side, MYT1L が occurrence されな confirmation されな が side. The <s:1> <s:1> phenomenon is similar to that of <s:1> cell lines other than H1299, にお, て, and て. MYT1L 発 now ベ ク タ ー は, culture cell lines に transient に import し た interstate に は function し た こ と か ら and MYT1L の constant な 発 now が cell lines の survival etc に と っ て good ま し く な い influence を も た ら す possibility が exam え ら れ た. Youdaoplaceholder0 て でまず でまず を, INSM1を import た たH1299 (h1299-insm1) を use そ て to parse を and import it into めた. H1299 - INSM1 に お け る endocrine particles masato even heritage 伝 son の 発 now を qRT PCR method に よ り parsing し た results, endocrine particles masato even survived 伝 は INSM1 に よ っ て は direct に induced さ れ な か っ た. INSM1 は god 経 endocrine な differentiation inducing factors of specific で あ の る side, endocrine particles formed に は deep く masato and し な が い possibility in さ れ た point は meaningful で あ る. The above records the <s:1> experiment に and the parallel て, the <s:1> compatibility of granular contents に and て て, and the <s:1> analysis を into めた. Before the annual に cropping し た カ ル シ ト ニ ン (CALCAv1 heritage 伝) 発 now ベ ク タ ー に plus え て, antidiuretic ホ ル モ ン (AVP heritage 伝) 発 now ベ ク タ ー を constructing し, H1299 cells に import し た. そ れ ら import strains に つ い line analytical を っ て ultrastructural morphology た と こ ろ, REST inhibit に え て PROX1 を import し, さ ら に CALCAv1 な い し は AVP posthumous son 伝 を import し た H1299 に お い て, endocrine particles と exam え ら れ る structure が confirm さ れ た. Now こ の result in pay け を る デ ー タ を 収 concentrated で あ る が, こ の results は, culture cell lines に man-made に を endocrine particles formed す る process に お い て, endocrine particles containing に さ れ る タ ン パ ク と し て は, そ の ホ ル モ ン の kinds は asked わ な が い possibility in さ れ た.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
REST遺伝子の抑制およびPROX1、POMC遺伝子の強制発現は非内分泌細胞株H1299に内分泌顆粒様構造物の形成を誘導する
REST基因的抑制以及PROX1和POMC基因的强制表达诱导非内分泌细胞系H1299中内分泌颗粒样结构的形成
- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:高木 恵美;宮澤 公輔;上村 任;石井 順;矢澤 華子;柏木 維人;河野 翔;平松 千恵;鈴木 盛一朗;矢澤 卓也.
- 通讯作者:矢澤 卓也.
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石井 順其他文献
小細胞肺癌細胞集団中のDLK1強陽性細胞は幼若神経マーカーを発現する
小细胞肺癌细胞群中DLK1强阳性细胞表达不成熟的神经标志物
- DOI:
- 发表时间:
2020 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
石井 順;矢澤華子;柏木維人;平松千恵;岩本雅美;正和明哲;矢澤卓也 - 通讯作者:
矢澤卓也
石井 順的其他文献
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