新規アルツハイマー病治療薬創出に向けたNRBP1-ユビキチンリガーゼ阻害剤の探索

寻找 NRBP1-泛素连接酶抑制剂以创建新的阿尔茨海默病疗法

• 批准号: 21K06769
• 负责人: 安川 孝史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kochi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06769/
• 关键词: アルツハイマー病; ユビキチンリガーゼ; NRBP1; BRI2; BRI3; アミロイドβ

東京大学創薬機構の中分子化合物ライブラリー(15,000化合物) を用いてスクリーニングを実施した。一次評価/二次評価は、二分子発光補完法を用いたハイスループットスクリーニングを理化学研究所の創薬・医療技術基盤プログラムの支援のもと実施した。一次評価では、化合物濃度5 μMにおいてNRBP1-BRI2間の結合阻害率50%以上かつ細胞増殖阻害率50%以下のものを選抜して321個の化合物が得られた。二次評価では、結合阻害の濃度依存性試験と偽陽性を排除するための全長Glucを用いたカウンター試験を行い、19個の化合物を選抜した。19個の化合物について高次評価（神経系培養細胞を用いて内在性BRI2の増加、Aβ40/42の産生抑制、Aβ42の凝集抑制について評価）を実施した。提供を受けた化合物量が少量であったため、ワンポイントの濃度で評価を試みたが、明らかな内在性BRI2の増加、Aβ産生の抑制を示す化合物は認められなかった。また、理研の生命科学・創薬研究支援基盤事業（BINDS）の支援(名古屋大 横島先生）により、1回目のスクリーニングで得られた天然物由来の化合物Aの類縁体を15個合成し評価を実施したが、化合物Aより活性の高いものは得られなかった。さらに、同BINDSの支援（東大 管先生）を受けて、特殊環状ペプチドライブラリーを用いたスクリーニングを実施したが、特異的な配列を有するペプチドは得られなかった。

使用中等分子化合物库（15,000种化合物）在日本制药公司（Tokyo of Tokyo）进行筛查。在Riken的药物发现和医疗技术基础设施计划的支持下，使用双分子发光互补方法进行了高通量筛查，进行了初级/次级评估。在初级评估中，从NRBP1-BRI2之间的结合抑制率和细胞生长抑制率为50％或更高的细胞生长抑制率和细胞增殖抑制率为50％或更低的化合物在5μM的化合物中，选择了321种化合物。在第二次评估中，通过浓度依赖性结合抑制测试和使用全长GLUC来消除假阳性的结合抑制和反测试选择了19种化合物。对19种化合物的较高评估（评估内源性BRI2增加，抑制Aβ40/42产生以及使用培养的神经系统细胞抑制Aβ42聚集）。由于所提供的化合物的量很小，因此我们尝试以一个分点的浓度进行评估，但是没有化合物明显增加内源性BRI2或抑制Aβ产生。 Furthermore, with support from RIKEN's Life Science and Drug Discovery Research Support Foundation Project (BINDS) (Prof. Yokoshima, Nagoya University), 15 analogues of compound A derived from natural products obtained from the first screening were synthesized and evaluated, but none of the compounds were more active than compound A. Furthermore, with support from the same BINDS (Prof. Kan, University of Tokyo), screening was carried out using a特殊的环状肽库，但没有获得具有特定序列的肽。

项目成果

NRBP1-ユビキチンリガーゼは生理的抗アルツハイマー病因子であるBRI2/BRI3の分解を制御する

NRBP1-泛素连接酶调节 BRI2/BRI3（一种生理性抗阿尔茨海默病因子）的降解

• 发表时间: 2021
• 作者: 安川 孝史;筒井 文;佐藤 チエリ;佐藤 滋生;Anita Saraf;Michael P Washburn;Laurence Florens;寺田 透;清水 謙多郎;Ronald C Conaway;Joan W Conaway;麻生 悌二郎
• 通讯作者: 麻生 悌二郎