アルツハイマー病遺伝子が誘導する神経細胞死抑制因子受容体の同定と機能解析

阿尔茨海默病基因诱导的神经细胞死亡抑制受体的鉴定及功能分析

• 批准号: 12780587
• 负责人: 安川 孝史
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780587/
• 关键词: アルツハイマー病; 神経細胞死; 受容体; 細胞死拮抗因子; 細胞死; パニング法

1.細胞表面の受容体数の予測細胞死抑制因子のS14G変異体の合成ペプチドをI-125で標識し、培養神経細胞F11に添加した後に架橋剤を用いて結合蛋白に固定して、細胞の放射活性を測定した。この放射活性は非標識体ペプチドを過剰に添加すると低下し、細胞死抑制効果のない変異体ペプチドでは顕著な変化が認められず、特異的な受容体の存在が再確認された。F11細胞に結合した放射活性量から、細胞表面のレセプター数は数百個程度と概算された。2.受容体下流のシグナル分析細胞内シグナル因子の阻害剤を用いて細胞死抑制因子の効果への影響を薬理学的に検討した。抑制因子の作用は、MAPキナーゼ阻害剤PD98059やPI-3キナーゼ阻害剤wortmanninでは変化がなく、チロシンキナーゼ阻害剤genisteinで完全に抑制された。さらに、チロシンキナーゼのひとつJAK2キナーゼ阻害剤AG490でも抑制された。よって、細胞死抑制因子のシグナルは受容体からチロシンキナーゼ特にJAK/STAT系を介して伝達されると推測された。3.レセプター同定への検討JAK/STATを活性化させる受容体として、成長ホルモンの様な単一受容体とサイトカインのようにgp130と共同で受容体の機能を果たす受容体が考えられた。パニング法による受容体探索が成功しなかったことから、この神経細胞死抑制因子の受容体は後者である可能性が高いと推測された。そこで、gp130を必要とする既知の受容体のアミノ酸配列から機能的には未知の複数の受容体候補を探索してその機能を確認している。

1. The number of capacitors on the cell surface was determined by the synthesis of cell death inhibitor S14G receptor, the synthesis of cell death inhibitor S14G receptor, the synthesis of cell death inhibitor S14G receptor, the synthesis of cell death inhibitor S14G, the synthesis of cell death inhibitor, the synthesis of cell death inhibitor S14G, the synthesis of cell death inhibitor S14G, the synthesis of cell death inhibitor, the synthesis of cell death inhibitor S14G, the synthesis of cell death inhibitor S14 The radiation activity is not related to the body weight. The filter filter adds the low dose, the cell death inhibition, the cell death inhibition, the radioactivity, and the presence of the special acceptor. The estimated values of radioactivity and cell surface concentration of F11 cells were significantly different from those of F11 cells. two。 The receptor was analyzed in terms of intracellular cytokines, cytokines, inhibitors of cell death, fruit, and physiology. Inhibitors act, MAP blocks PD98059, PI-3 blocks wortmannin, inhibits wortmannin, inhibits genistein, completely suppresses it. To stop JAK2, to block AG490, to restrain others. Cell death inhibitor

项目成果

Niikura T., et al.: "Insulin-like growth factor I(IGF-I)protects cells from apoptosis by Alzheimer's V642I mutant amyloid precursor protein through IGF-I receptor in an IGF-binding protein-sensitive manner"Jourmal of Neuroscience. 21. 1902-1910 (2001)

Niikura T. 等人：“胰岛素样生长因子 I (IGF-I) 通过 IGF-I 受体以 IGF 结合蛋白敏感的方式保护细胞免受阿尔茨海默病 V642I 突变淀粉样前体蛋白的凋亡”《神经科学杂志》。

Hashimoto Y, et al: "A rescue factor abolishing neuronal cell death by a wide spectrum of familial Alzheimer's disease genes and Aβ"Proceedings of National Academy of Science USA. 98. 6336-6341 (2001)

Hashimoto Y 等人：“通过广泛的家族性阿尔茨海默病基因和 Aβ 消除神经元细胞死亡的拯救因子”美国国家科学院院刊 98. 6336-6341 (2001)。

Sudo H., et al.: "Secreted Aβ does not mediate neurotoxicity by antibody-stimulated amyloid precursor protein"Biochemical and Biophysical Research Communications. 282. 548-556 (2001)

Sudo H.等人：“分泌的 Aβ 不会通过抗体刺激的淀粉样前体蛋白介导神经毒性”《生物化学和生物物理研究通讯》282. 548-556 (2001)。

Niikura,T et al.: "IGF-I protects cells from apoptosis by Alzheimer's V6421 mutant APP through IGF-I receptor in an IGF binding protein-sensitive manner."TheJournal of Neuroscience. (In press). (2000)

Niikura,T 等人：“IGF-I 通过 IGF-I 受体以 IGF 结合蛋白敏感的方式保护细胞免受阿尔茨海默病 V6421 突变体 APP 的凋亡。”神经科学杂志。

Matsuda S., et al.: "c-Jun N-terminal kinase (JNK)-interacting protein-1b/islet-brain-1 scaffolds Alzheimer's amyloid precursor protein with JNK"Jourmal of Neuroscience. 21. 6597-6607 (2001)

Matsuda S.等人：“c-Jun N-末端激酶（JNK）相互作用蛋白-1b/islet-brain-1 用 JNK 支架阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白”《神经科学杂志》。