異分野・新旧融合実験手法による高病原性ウイルスタンパク質の細胞内輸送機構の解明

利用不同领域和新旧融合实验方法阐明高致病性病毒蛋白的细胞内转运机制

• 批准号: 21K07043
• 负责人: 浦田 秀造
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07043/
• 关键词: ウイルスマトリックスタンパク質; 高病原性ウイルス; 宿主因子

本研究は高病原性ウイルスの内、エボラウイルスそしてラッサウイルスを含むアレナウイルスのウイルス粒子形成に関与するマトリックスタンパク質の細胞内における挙動を分子レベルで明らかとするものである。エボラウイルスはVP40、アレナウイルスはZタンパク質がマトリックスタンパク質として機能し、粒子形成において中心的な役割を果たす。1.我々はこれまでにエボラウイルスVP40による粒子産生を阻害する新規低分子化合物を同定して報告し (Urata et al., Antiviral Research, 2022)、この新規低分子化合物に特異的に結合し得る細胞内タンパク質としてミトコンドリア関連タンパク質2つを同定した。同定した2種類のミトコンドリア関連タンパク質の内1つに対するsiRNAを設計し、トランスフェクションによるタンパク質発現減少を確認した上でVP40による粒子産生に与える影響を検討した。しかしながら、粒子産生が顕著に減少する安定した結果を得るには至らなかった。また、同定した新規低分子化合物の293T細胞のミトコンドリア膜電位への影響はないことを確認した。2.について、我々は複数のアレナウイルスZタンパク質がRab10、Rab13やRab25といった細胞内小胞輸送を制御する低分子量GTP結合タンパク質との細胞内共局在を観察している。これらのRabのアレナウイルスZによる粒子産生への影響を検討するため、昨年に引き続きRab関連因子の発現プラスミドクローニングを進めている。3.について、アレナウイルスのZタンパク質はその細胞内複製においてゲノム複製抑制、そしてこれに引き続き粒子形成と2つの役割を経時的に使い分けるが、それぞれに関与する宿主因子の詳細は不明である。そこでそれぞれの過程でZと近接する宿主因子を網羅的に解析することを目的にSNAPタグ付加組換えLCMVの作成を昨年度に引き続き進めたが、作成することができなかった。

This study demonstrates that the formation of highly pathogenic els and els particles including els and els in els is related to the movement of molecules in the cytoplasm of els. Vp40, Vp40, Vp 40, 1. We report on the determination of new low molecular weight compounds to inhibit particle production (Urata et al., Antiviral Research, 2022), the new regulation of low molecular weight compounds for specific binding to obtain intracellular substances. The design of siRNAs, the identification of siRNAs, the identification of siRNAs, and the analysis of VP40 particle production and their effects were investigated. The particles are produced in a stable manner. The effect of low molecular weight compounds on the membrane potential of 293T cells was confirmed. 2. To observe the intracellular co-regulation of low molecular weight GTP binding proteins in Rab10, Rab13 and Rab25. This paper discusses the influence of Rab's correlation factors on particle generation in the past years. 3. In the case of intracellular replication, the host factors involved in replication inhibition, particle formation, and gene expression are unknown. The host factor is closely related to the host factor. The host factor is closely related to the host factor. The host factor is closely related to the host factor.

项目成果

Identification of novel chemical compounds targeting filovirus VP40-mediated particle production

鉴定针对丝状病毒 VP40 介导的颗粒产生的新型化合物

• DOI: 10.1016/j.antiviral.2022.105267
• 发表时间: 2022
• 期刊: Antiviral Research
• 影响因子: 7.6
• 作者: Urata Shuzo;Omotuyi Olaposi Idowu;Izumisawa Ayako;Ishikawa Takeshi;Mizuta Satoshi;Sakurai Yasuteru;Mizutani Tatsuaki;Ueda Hiroshi;Tanaka Yoshimasa;Yasuda Jiro
• 通讯作者: Yasuda Jiro

Make a Science of the medicine against the highly pathogenic viruses

建立抗击高致病性病毒的医学科学

• 发表时间: 2022
• 作者: Koma Takaaki;Doi Naoya;Suzuki Akihiro;Nagamatsu Kentaro;Yasui Takeshi;Yasutomo Koji;Adachi Akio;Minamikawa Takeo;Nomaguchi Masako;小野慎子;Shuzo Urata
• 通讯作者: Shuzo Urata