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Reveling the intra-cellular replication machinery of Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus by using live-cell imaging.

利用活细胞成像揭示严重发热伴血小板减少综合征病毒的细胞内复制机制。

基本信息

批准号：
21K07059
负责人：
高松由基
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ライブセルイメージング技術は病原体の細胞内複製機構を理解するために非常にパワフルで有用である。本研究では新興感染症の病原体として本邦で重要な高病原性ウイルスである重症熱性血小板減少症候群ウイルス:SFTSVの複製機構を、ライブセルイメージングを用いて解明する。SFTSVの細胞内動態はほとんどわかっておらず、ウイルス粒子の形成や輸送に関わる宿主因子も不明である。病原体の細胞内動態を解明することは、侵入経路・輸送経路や介在タンパク質、出芽制御因子を介した治療法を開発するための基盤となることが期待される。研究代表者は前駆研究で、リボ核タンパク質複合体(RNP)やウイルス粒子などウイルスタンパク質複合体の細胞内での形成過程・輸送経路を描出するライブセルイメージングシステムを構築し、病原体の細胞内動態を描出することに成功した(Takamatsu, et al. PNAS. 2018, Takamatsu, et al. J. Virol. 2020)。本研究では、このシステムを応用しSFTSVの細胞内動態について宿主因子を含めて解明することを目的とする。最終的な到達目標はウイルス因子・宿主因子間の相互作用を解明し、SFTSVの形成・輸送を制御する新たな作用機序の治療薬開発に貢献することである。本研究では、BSL-3病原体であるSFTSVについてライブセルイメージングシステムを構築し、ヌクレオカプシドおよびウイルス粒子の形成機構、細胞内動態を解明することを目指す。本研究を進めるために、電子顕微鏡、超解像顕微鏡、ライブセルイメージング顕微鏡技術に精通すると共に、得られた画像・動画を解析するための解析技術の習得を進めている。

The technology is very useful for understanding the intracellular replication mechanisms of pathogens. This study is intended to clarify the role of pathogens of emerging infectious diseases in severe febrile thrombocytopenia syndrome:SFTSV replication mechanisms. The intracellular dynamics of SFTSV are unknown due to the host factors involved in particle formation and transport. The intracellular dynamics of pathogens are understood in the following ways: invasion pathways, transport pathways, development of therapeutic agents, and mechanisms for budding control factors. Research representatives have successfully studied the intracellular formation and transport pathways of nuclear protein complexes (RNP), particles, and pathogens (Takamatsu, et al. PNAS). 2018, Takamatsu, et al. J. Virol. 2020)。The purpose of this study is to understand the intracellular dynamics of SFTSV and its host factors. The ultimate goal is to understand the interactions between SFTS factors and host factors, and to contribute to the development of new mechanisms for SFTS formation and transport. This study aims to build a comprehensive information management system for the BSL-3 pathogen SFTSV, and to understand the formation mechanism and intracellular dynamics of Kokapsid and information particles. This study advances in the acquisition of electronic micromirrors, super-resolution micromirrors, and analytical techniques for micromirrors.