膵癌における腫瘍促進性好中球の機能獲得機序解明と新規抗体医薬開発

胰腺癌促瘤中性粒细胞功能获得机制的阐明及新型抗体药物的开发

• 批准号: 21K07243
• 负责人: 堀岡 宏平
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07243/
• 关键词: 膵癌; 腫瘍促進性好中球; 癌関連線維芽細胞; 腫瘍微小環境; 癌間質相互作用; 膵星細胞; オートファジー; 抗体医薬; 好中球; 癌微小環境

本研究の目的は膵癌間質細胞の特定の集団が、好中球の腫瘍微小環境中での役割、特に腫瘍促進性の好中球への分化に作用しているかを解明することである。ステップ【1】で、膵癌細胞同所移植マウスの腫瘍中の好中球とマウスの末梢血の好中球を単離し、それぞれをマウスの脾臓から抽出したCD8T細胞と共培養すると、腫瘍中の好中球群において、有意にCD8の細胞障害性マーカーである、GranzymeBやIFN-γが減少し、疲弊化マーカーであるPD-1やTIM3が有意に上昇していた。この結果から、腫瘍中の好中球はCD8+T細胞の機能を抑制していることが示唆された。ステップ【2】で、ヒト膵腫瘍中の好中球とヒト末梢血中の好中球を用いて、サイトカインアレイを行い、膵癌細胞の増殖や浸潤を進展されるサイトカインを4つ同定した。さらにマウスの腫瘍内の好中球と末梢血の好中球をマイクロアレイ解析し、腫瘍内好中球群において、T細胞の機能に関連することが報告されている遺伝子Aが上昇していることを突き止めた。当研究室ではシングルセルRNAシーケンシングによる1細胞毎の網羅的遺伝子発現解析の手技を確立しており、消化器癌における癌関連線維芽細胞と骨髄由来の免疫細胞抑制細胞の相互作用分子を同定済みである。今後は膵癌においても、シングルセルRNAシーケンシングによる間質細胞のheterogenityを反映する複数のサブセットから、好中球浸潤の強いモデルに特徴的な集団に着目していく予定である。

这项研究的目的是阐明特定的胰腺癌基质细胞是否在肿瘤微环境中的嗜中性粒细胞中起作用，尤其是在促进肿瘤分化为中性粒细胞中的中性粒细胞。在步骤[1]中，分离出小鼠骨诱导的胰腺癌细胞和中性粒细胞的嗜中性粒细胞分离出外周血中的中性粒细胞，并且当每个细胞与从小鼠脾脏中提取的CD8T细胞共培养时增加。这些结果表明，肿瘤中的中性粒细胞抑制CD8+ T细胞的功能。在步骤[2]中，使用来自人类胰腺肿瘤的嗜中性粒细胞和人类外周血中的中性粒细胞进行细胞因子阵列，并鉴定出了鉴定出胰腺癌细胞增殖和侵袭的四种细胞因子。此外，我们通过微阵列分析分析了小鼠中嗜中性粒细胞和外周血中嗜中性粒细胞，发现据报道与T细胞功能相关的基因A在肿瘤内粒细胞组中升高。我们的实验室通过单细胞RNA测序为一个细胞建立了一项全面的基因表达分析技术，并确定了癌症相关的成纤维细胞与骨髓衍生的免疫细胞抑制细胞之间的相互作用分子。将来，我们计划关注胰腺癌中强中性粒细胞侵袭的人群的特征，这是来自多个通过单细胞RNA测序反映基质细胞异质性的子集。

项目成果

LOCAL NEUTROPHILS CAN DIFFERENTIATE INTO PMN－MDSC IN GASTRIC CANCER

胃癌中局部中性粒细胞可分化为 PMN－MDSC

• 发表时间: 2022
• 作者: Chikanori Tsutsumi;Kenoki Ohuchida;Shoichi Nakamura;Sho Okuda;Kyoko Hisano;Yoshiki Otsubo;Koji Shindo;Taiki Moriyama;Yusuke Mizuuchi;Kohei Nakata;Masafumi Nakamura
• 通讯作者: Masafumi Nakamura