アルツハイマー病危険因子が発症頻度を増加させるメカニズムの解明

阐明阿尔茨海默病危险因素增加阿尔茨海默病发病率的机制

• 批准号: 21K07296
• 负责人: 城谷 圭朗
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07296/
• 关键词: アルツハイマー病; 炎症; ミクログリア; TREM2; 危険因子

課題①　Trem2 R47Hノックインマウスでのアルツハイマー病の病理と発症の促進作製した野生型とR47H変異型Trem2のホモノックインマウスをアルツハイマー病モデルマウスAppNL-Fと交配し、それぞれ雌雄ともに30匹程度繁殖した。予備検討として12～24ヶ月齢のAppNL-Fマウスの大脳皮質や海馬にアミロイド斑が出現していることを確認したが、12ヵ月齢ではアミロイド斑がわずかであった。当初15ヵ月齢以下のマウスで解析しようと考えていたが、研究を完遂させるために12、18、24ヵ月齢での解析に切り替えた。課題②　Trem2 R47Hノックインマウスの初代培養ミクログリアの機能変化Trem2の貪食能を解析する実験系を作製した。具体的には、細胞内に取り込まれると蛍光を発するpHrodoで標識した大腸菌もしくは死細胞をミクログリアとインキュベーション後、プレートリーダーで蛍光を測定した。ところが得られる初代培養ミクログリアの数が少なく貪食アッセイには不向きであったため、同じく自然免疫細胞でミクログリアと性質が似ている初代培養骨髄由来マクロファージを用いた。その結果これまでの論文とは異なり野生型とTrem2ノックアウトマクロファージ間では貪食能に差はなかった。そこでLPSでマクロファージを活性化させた状態で貪食能を比較したところ、野生型の方がより貪食能が増加した。これよりTrem2はLPSによるマクロファージの貪食能活性化に機能していると考えられた。次に野生型Trem2とR47H変異型Trem2ノックインマウスのマクロファージで貪食能を比較したところ、LPSの有無にかかわらず貪食能に有意な差はなかった。課題③　発症への時間軸に沿ったミクログリアの遺伝子発現プロファイルの変化マウスを加齢させ年齢に達した時点で脳を採取している段階である。

Subject (1) Trem2 R47H ノ ッ ク イ ン マ ウ ス で の ア ル ツ ハ イ マ の ー disease pathology と 発 disease の promote cropping し た wild-type と R47H - alien Trem2 の ホ モ ノ ッ ク イ ン マ ウ ス を ア ル ツ ハ イ マ ー disease モ デ ル マ ウ ス AppNL -f と し, mating そ れ ぞ れ male and female と も に 30 degree of horse breeding し た. Beg と reserve 検 し て ヶ 12 ~ 24 months 齢 の AppNL -f マ ウ ス の big 脳 や hippocampus cortex に ア ミ ロ イ ド が develop し て い る こ と を confirm し た が, 12 ヵ month 齢 で は ア ミ ロ イ ド spot が わ ず か で あ っ た. Original の 齢 ヵ month under 15 マ ウ ス で parsing し よ う と exam え て い た が finish, research を hence さ せ る た め に 12, 18, 24 ヵ month 齢 で の parsing に cut り for え た. Subject (2) Trem2 R47H ノ ッ ク イ ン マ ウ ス の original culture ミ ク ロ グ リ ア の function - the Trem2 の bulimia can を parsing す る be 験 を makes system し た. Specific に は, intracellular に り 込 ま れ る と 蛍 light を 発 す る pHrodo で logo し た coliform も し く は dead cells を ミ ク ロ グ リ ア と イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン, プ レ ー ト リ ー ダ ー で 蛍 light を determination し た. と こ ろ が have ら れ る original culture ミ ク ロ グ リ ア の number less が な く gluttony ア ッ セ イ に は to き で あ っ た た め, with じ く natural immune cells で ミ ク ロ グ リ ア と nature が like て い る original culture of bone marrow origin マ ク ロ フ ァ ー ジ を with い た. そ の results こ れ ま で の paper と は different な り wild-type と Trem2 ノ ッ ク ア ウ ト マ ク ロ フ ァ ー ジ between で は gluttony に worse は な か っ た. そ こ で LPS で マ ク ロ フ ァ ー ジ を activeness さ せ た state で gluttony are を し た と こ ろ, wild type の が よ り bulimia can が raised plus し た. Youdaoplaceholder2 れよ れよ Trem2 による LPSによる ロファ ロファ ジ ジ the activation of the に function of gluttiness <s:1> て ると ると examination えられた. Time に wild-type Trem2 と R47H - alien Trem2 ノ ッ ク イ ン マ ウ ス の マ ク ロ フ ァ ー ジ で gluttony are を し た と こ ろ, LPS の presence of に か か わ ら ず gluttony に intentionally な worse は な か っ た. Subjects (3) 発 disease へ の timeline に along っ た ミ ク ロ グ リ ア の heritage 伝 son 発 now プ ロ フ ァ イ ル の variations change マ ウ ス を plus 齢 さ せ years 齢 に da し た point で 脳 を take し て い る Duan Jie で あ る.

项目成果

アルツハイマー病危険因子 TREM2 の解析

阿尔茨海默病危险因素TREM2分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 城谷圭朗;渡辺かおり，脇田 直樹，奥田 泰生，米須 拓也，池水 文香，岩田修永
• 通讯作者: 渡辺かおり，脇田 直樹，奥田 泰生，米須 拓也，池水 文香，岩田修永

カテキン誘導体との相互作用によるTMEM106Bのネプリライシン発現調節機構の解析

TMEM106B与儿茶素衍生物相互作用对脑啡肽酶表达的调控机制分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 池水文香;渡辺かおり;堀祐真;宮内完季;増田豪;大槻純男;八田大典;城谷圭朗;田中隆;岩田修永
• 通讯作者: 岩田修永

マウス線条体におけるジスキネジア関連分子PRRT2のドーパミン神経伝達における役割

运动障碍相关分子PRRT2在小鼠纹状体多巴胺神经传递中的作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 八田 大典;光成 晃輝;永田 健太郎;金本 海斗;濱田 麻希;西村 聖未;渕上 由貴;川上 茂;木下 晃;吉浦 孝一郎;黒滝 直弘;城谷 圭朗;岩田 修永
• 通讯作者: 岩田 修永

脂溶性カテキン誘導体と相互作用するタンパク質の同定

鉴定与脂溶性儿茶素衍生物相互作用的蛋白质

• 发表时间: 2021
• 作者: 池水文香;藤本康平;増田豪;平山未央;大槻純男;八田大典;城谷圭朗;田中隆;岩田修永
• 通讯作者: 岩田修永

The role of TREM2 N-glycans in trafficking to the cell surface and signal transduction of TREM2

TREM2 N-聚糖在运输至细胞表面和 TREM2 信号转导中的作用

• DOI: 10.1093/jb/mvac073
• 发表时间: 2022
• 期刊: The Journal of Biochemistry
• 作者: Shirotani Keiro;Hatta Daisuke;Wakita Naoki;Watanabe Kaori;Iwata Nobuhisa
• 通讯作者: Iwata Nobuhisa