Development of novel therapy for thrombosis induced by neutrophil extracellular traps

本研究の目的は、好中球のNETs(Neutrophil extracellular traps)を契機とする血栓形成の分子機構を解明して、血栓症の新規治療法を開発することである。NETsは、好中球のクロマチンが網状構造に変化して、病原体を捕捉する感染防御システムである。近年、NETsが血小板や血液凝固カスケードを刺激して、血栓症を誘発することが注目されている。そこで本研究では、NETs形成に重要な分子と化学反応を見いだし、その制御を通して血栓症の新規治療法を開発する事をめざす。昨年度に引き続き、S100A8、S100A9についての解析を進めた。S100A8、S100A9は共に、プロテインS100ファミリーに属するカルシウム結合タンパク質である。以前に実施した質量分析の結果より、好中球のNETs形成過程で化学修飾を受ける重要なタンパク質として注目している。S100A8、S100A9それぞれのノックアウト型好中球モデルを作成し、野生型と比較して、mRNAの発現量が有意に変化する遺伝子群をGSEA解析により探索した。１）S100A8ノックアウト細胞と野生型、２）S100A9ノックアウト細胞と野生型の比較をおこなったところ、両解析において、概ね同様の結果が認められた。ウエスタンブロッティング法による解析において、S100A8のノックアウトでS100A9の発現が、S100A9のノックアウトでS100A8の発現が抑制される事をすでに確認しており、両分子がmRNAレベルで、互いに発現を調節していることが示唆された。引き続き、S100A8、S100A9のノックアウトによりmRNAが有意に上昇する遺伝子群と、減少する遺伝子群、それぞれについて、タンパク質レベルでの発現への影響を検証するとともに、好中球のNETs形成、および好中球の機能に与える影響について解析を進めている。

本研究の目的は、好中球のNETs(Neutrophil extracellular traps)を契機とする血栓形成の分子機構を解明して、血栓症の新規治療法を開発することである。NETsは、好中球のクロマチンが網状構造に変化して、病原体を捕捉する感染防御システムである。近年、NETsが血小板や血液凝固カスケードを刺激して、血栓症を誘発することが注目されている。そこで本研究では、NETs形成に重要な分子と化学反応を見いだし、その制御を通して血栓症の新規治療法を開発する事をめざす。昨年度に引き続き、S100A8、S100A9についての解析を進めた。S100A8、S100A9は共に、プロテインS100ファミリーに属するカルシウム結合タンパク質である。以前に実施した質量分析の結果より、好中球のNETs形成過程で化学修飾を受ける重要なタンパク質として注目している。S100A8、S100A9それぞれのノックアウト型好中球モデルを作成し、野生型と比較して、mRNAの発現量が有意に変化する遺伝子群をGSEA解析により探索した。１）S100A8ノックアウト細胞と野生型、２）S100A9ノックアウト細胞と野生型の比較をおこなったところ、両解析において、概ね同様の結果が認められた。ウエスタンブロッティング法による解析において、S100A8のノックアウトでS100A9の発現が、S100A9のノックアウトでS100A8の発現が抑制される事をすでに確認しており、両分子がmRNAレベルで、互いに発現を調節していることが示唆された。引き続き、S100A8、S100A9のノックアウトによりmRNAが有意に上昇する遺伝子群と、減少する遺伝子群、それぞれについて、タンパク質レベルでの発現への影響を検証するとともに、好中球のNETs形成、および好中球の機能に与える影響について解析を進めている。