グリア系細胞におけるタイトジャンクションの意義と神経病態への関与

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BBBの構築制御には 血管内皮細胞だけでなく、その周囲に存在するアストロサイトも深く関わる。最近、申請者らは、アストロサイトにTJの構築と機能の分子基盤である接着分子クローディン（Cldn）が発現することを見出した。本研究では、神経病態下における、特に、脳梗塞後におけるBBBにおけるアストロサイト、血管内皮におけるCldn、オクルディン（occludin）などのTJ蛋白の動態を検討。OccludinもBBBでは、血管内皮に加えて、アストロサイトにも発現している。そこで、occludinノックアウトマウス、Cldn遺伝子改変マウスなどを作成し意義を検討。オクルディンは生理的な状態においてはノックアウトマウスを作製してもBBBの構築は保たれ、他方、in vivoでの検討も少なく、病態での意義も不明のため検討した。脳梗塞後にオクルディン、Cldn-5，ZO-1のmRNA発現は急性期から低下し、オクルディンと同じMARVELファミリーのトリセルリンは脳梗塞後6時間まで維持されていたが、その後徐々に減少。免疫蛍光染色では，脳梗塞の24時間後、オクルディンの発現が低下し、Cldn-5とZO-1の発現が低下した。オクルディンKOマウスでは、脳梗塞による梗塞サイズが増大し、神経機能が急性期から慢性期まで悪化し、死亡率が上昇した。オクルディンKOではWTよりクローディン-5とZO-1のmRNA、蛋白発現量が低下。分子量10kDaの蛍光ラベルデキストランの血管外漏出は，脳梗塞後7日後でもKOが野生型よりも増大。これらの検討より、オクルディンは、特に脳梗塞後において、Cldn-5とZO-1の発現を制御することによりBBB機能を調節し、脳梗塞後の急性期から慢性期に至るまでBBB障害に関与し、神経学的な悪化をもたらしていた。更に、アストロサイトにおける各種、Cldn、オクルディンの検討を進めている。