グリア系細胞におけるタイトジャンクションの意義と神経病態への関与

神经胶质细胞紧密连接的意义及其在神经病理学中的参与

基本信息

批准号：
21K07414
负责人：
佐々木勉
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

BBBの構築制御には血管内皮細胞だけでなく、その周囲に存在するアストロサイトも深く関わる。最近、申請者らは、アストロサイトにTJの構築と機能の分子基盤である接着分子クローディン（Cldn）が発現することを見出した。本研究では、神経病態下における、特に、脳梗塞後におけるBBBにおけるアストロサイト、血管内皮におけるCldn、オクルディン（occludin）などのTJ蛋白の動態を検討。OccludinもBBBでは、血管内皮に加えて、アストロサイトにも発現している。そこで、occludinノックアウトマウス、Cldn遺伝子改変マウスなどを作成し意義を検討。オクルディンは生理的な状態においてはノックアウトマウスを作製してもBBBの構築は保たれ、他方、in vivoでの検討も少なく、病態での意義も不明のため検討した。脳梗塞後にオクルディン、Cldn-5，ZO-1のmRNA発現は急性期から低下し、オクルディンと同じMARVELファミリーのトリセルリンは脳梗塞後6時間まで維持されていたが、その後徐々に減少。免疫蛍光染色では，脳梗塞の24時間後、オクルディンの発現が低下し、Cldn-5とZO-1の発現が低下した。オクルディンKOマウスでは、脳梗塞による梗塞サイズが増大し、神経機能が急性期から慢性期まで悪化し、死亡率が上昇した。オクルディンKOではWTよりクローディン-5とZO-1のmRNA、蛋白発現量が低下。分子量10kDaの蛍光ラベルデキストランの血管外漏出は，脳梗塞後7日後でもKOが野生型よりも増大。これらの検討より、オクルディンは、特に脳梗塞後において、Cldn-5とZO-1の発現を制御することによりBBB機能を調節し、脳梗塞後の急性期から慢性期に至るまでBBB障害に関与し、神経学的な悪化をもたらしていた。更に、アストロサイトにおける各種、Cldn、オクルディンの検討を進めている。

不仅血管内皮细胞，而且周围的星形胶质细胞都与BBB结构的调节深深相关。最近，申请人发现星形胶质细胞表达粘附分子CLDN，这是TJS构建和功能的分子基础。这项研究检查了血管内皮中BBB，CLDN和Occludin中TJ蛋白的动力学，尤其是在脑梗塞后，BBB中的动力学。除血管内皮以及星形胶质细胞外，闭合蛋白还在BBB中表达。因此，我们创建了闭塞敲除小鼠，CLDN转基因小鼠，并检查了小鼠的重要性。在生理状态下，即使产生了基因敲除小鼠，Occludin也保留了BBB构造，但另一方面，体内研究很少，病理状况的重要性尚不清楚，因此进行了这项研究。脑梗塞后，闭合蛋白，CLDN-5和ZO-1的mRNA表达从急性期降低，而Tricerlin（与Ockludin相同的奇迹家族）一直保持到脑梗塞后6小时，但此后逐渐减少。免疫荧光染色表明，脑梗塞后24小时咬合蛋白表达降低，CLDN-5和ZO-1表达降低。在occludin ko小鼠中，由于脑梗塞引起的梗塞大小增加，神经功能从急性到慢性变化，死亡率增加。 Occludin KO的mRNA和蛋白质表达水平低于WT。即使在脑梗塞后7天后，荧光标记的右右右旋脱氧液的脱粒也会增加。基于这些研究，Occludin通过控制CLDN-5和ZO-1的表达来调节BBB功能，尤其是在大脑梗死后，并参与了从急性到脑梗塞后从急性到慢性阶段的BBB疾病，导致神经系统恶化。此外，我们目前正在考虑各种类型的星形胶质细胞，CLDN和Occludin。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

急性期脳梗塞のHot topics. (シンポジウム)病理、基礎

急性脑梗死的热点话题（研讨会）病理学、基础知识。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Zen Rika;Terashima Tomoya;Tsuji Shunichiro;Katagi Miwako;Ohashi Natsuko;Nobuta Yuri;Higuchi Asuka;Kanai Hirohiko;Murakami Takashi;Kojima Hideto;3.福田麻佐美，豊島翔太，丸岡秀一郎，岡山吉道，權　寧博;佐々木　勉
通讯作者：
佐々木　勉

The effect of occludin deficiency in Tight Junction in Blood Brain Barrier after stroke.

中风后血脑屏障紧密连接中occludin缺乏的影响。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Shintaro Sugiyama;Tsutomu Sasaki;Hiroo Tanaka;Yan Haomin;Takeshi Ikegami;Hideaki Kanki;Atsushi Tamura;Sachiko Tsukita;Hideki Mochizuki.
通讯作者：
Hideki Mochizuki.