脳卒中に対する再生医療にむけた神経細胞新生の機序の解明と分子イメージング

1.14C-acetateのin vitroでの動態並びにヒトにおけるacetateの画像化:我々はヒトacetate画像の作製に成功し、これらは脳血流画像などと異なり、脳白質に集積が多かった。ヒトではげっ歯類と異なり白質の割合が極めて高い。この為、ヒト神経系細胞株、アストロ細胞株に加え、オリゴデンドロ細胞株を用いて、in vitroでの14C-acetateの取り込みを検討した。acetateは、アストロ細胞株には取り込まれるが、オリゴデンドロ細胞株には殆ど取り込まれず、ヒト脳acetate画像はアストロサイトの機能、代謝を反映することが示唆された。human MCT-1,2,4各々のsiRNAiを作成し、ヒト画像における取り込み機序を検討。又、脳虚血病態としてOGD(oxygen glucose deprivation)、炎症に関係してLPSにより取り込みが上昇し、MCT-1発現亢進が関与していた。臨床的に用いられている33度で培養すると37度より、acetateの取り込みは低下した。又、神経のシナプス活動(シナプス部でのNMDA受容体活性化)がアストロサイトの代謝を亢進させた。ヒトではげっ類とは異なり、アストロサイトの比率、白質の容積が多く、従来のげっ歯類を用いた病態解明、治療法の開発では不十分な可能性あり、その意味でヒト画像-ヒト細胞を用いた今回の成果は意義深い。2.初代神経細胞培養系におけるCREB-CRE転写活性の動態:OGD後著明にCRE転写活性が亢進する。CREB KID domainに加え、bZIP domainによっても調節されていた。その制御機構は従来報告されている以外の経路が主で、これらの経路阻害は神経細胞保護効果に繋がる結果が示された。3.虚血後神経細胞新生:海馬においては、PDEIV阻害薬投与による薬理学的CREB-CREカスケードの活性化は、海馬新生神経細胞の生存を亢進した(論文化)。又CREB dominant activeマウスにて、側脳質周囲での神経細胞新生は亢進しており、これらの虚血後の再生過程にアストロサイトが関与していた。

1.14C-acetateのin vitroでの動態並びにヒトにおけるacetateの画像化:我々はヒトacetate画像の作製に成功し、これらは脳血流画像などと異なり、脳白質に集積が多かった。ヒトではげっ歯類と異なり白質の割合が極めて高い。この為、ヒト神経系細胞株、アストロ細胞株に加え、オリゴデンドロ細胞株を用いて、in vitroでの14C-acetateの取り込みを検討した。acetateは、アストロ細胞株には取り込まれるが、オリゴデンドロ細胞株には殆ど取り込まれず、ヒト脳acetate画像はアストロサイトの機能、代謝を反映することが示唆された。human MCT-1,2,4各々のsiRNAiを作成し、ヒト画像における取り込み機序を検討。又、脳虚血病態としてOGD(oxygen glucose deprivation)、炎症に関係してLPSにより取り込みが上昇し、MCT-1発現亢進が関与していた。臨床的に用いられている33度で培養すると37度より、acetateの取り込みは低下した。又、神経のシナプス活動(シナプス部でのNMDA受容体活性化)がアストロサイトの代謝を亢進させた。ヒトではげっ類とは異なり、アストロサイトの比率、白質の容積が多く、従来のげっ歯類を用いた病態解明、治療法の開発では不十分な可能性あり、その意味でヒト画像-ヒト細胞を用いた今回の成果は意義深い。2.初代神経細胞培養系におけるCREB-CRE転写活性の動態:OGD後著明にCRE転写活性が亢進する。CREB KID domainに加え、bZIP domainによっても調節されていた。その制御機構は従来報告されている以外の経路が主で、これらの経路阻害は神経細胞保護効果に繋がる結果が示された。3.虚血後神経細胞新生:海馬においては、PDEIV阻害薬投与による薬理学的CREB-CREカスケードの活性化は、海馬新生神経細胞の生存を亢進した(論文化)。又CREB dominant activeマウスにて、側脳質周囲での神経細胞新生は亢進しており、これらの虚血後の再生過程にアストロサイトが関与していた。