Development of detection method for multiple disease-causative proteins using dried blood spots

点击翻译按钮获取中文摘要

乾燥ろ紙血から抽出した蛋白質に特化した高深度プロテオーム解析法の開発を行った。血液蛋白質はこれまで解析してきた培養細胞や生体組織と蛋白質の種類や濃度のダイナミックレンジが大きく異なるためシステムを再構築する必要がある。LC-MSのLCシステムについては、カラム充填剤の種類、カラム長、流速などを最適化した。MS部分についてはより多くの乾燥ろ紙血蛋白質を観測する為のイオン化法の改良、DIA法のMSレンジ、Isolation window幅、フラグメントイオンの蓄積時間などのパラメーターやノイズ除去の為のイオンモビリティーの電圧条件を最適化した。またin silico蛋白質同定用データベースを構築することにより、最終的に1検体1測定により乾燥ろ紙血から500以上の疾患原因蛋白質を含む3,000以上の蛋白質の同定・定量することができた。