C型肝炎ウイルスおよび新型コロナウイルス複製に必要な膜小胞の形成メカニズムの解析

丙型肝炎病毒及新型冠状病毒复制所需膜囊泡形成机制分析

• 批准号: 21K07974
• 负责人: 相崎 英樹
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07974/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; 新型コロナウイル; doble membrane vesicle; NS5A; サブゲノミックレプリコン; HSD11; 新型コロナウイルス; プラス鎖RNAウイルス; 複製; double membrane vesicle

本研究の目的は、C型肝炎ウイルス(HCV)をモデルとしてdoble membrane vesicles (DMV)形成に関与する宿主因子を見出し、DMV形成のメカニズムを明らかにすることである。HCVのDMV形成についてはNS5AがDMV形成に必須なことが知られている。そこで、Huh7細胞にサブゲノミックレプリコンを導入し、NS5Aで免疫沈降反応を行なって、プロテオーム解析を行なったところ、NS5A結合タンパクとして11β-Hydroxysteroid dehydrogenase (HSD11)を見出した。さらに、脂肪滴周辺膜の比較プロテオーム解析からもHSD11を見出し、HSD11がウイルス粒子産生に重要な役割を持つことを示した。HSD11は多くの臓器に広く分布している。一方、HSD13はHSD11と近い構造を持ち、機能も類似しているが、肝細胞に主に存在している。そこで、HSD13とHCV粒子形成の関連性を調べている。SARS-CoV-2に感染したVero細胞及び腸管オルガノイドからRNAおよびDNAを抽出し、qRT-PCR、qPCRを行った結果、RNAとDNAの両方からウイルス遺伝子の増幅が観察された。また、COVID-19罹患後の大腸検体を用いた解析でも、RNAとDNAの両方からランダムに増幅されていることが明らかになり、SARS-CoV-2が逆転写される可能性が示唆されている。

The aim of this study was to identify host factors involved in the formation of doble-membrane vesicles (DMV) and to clarify the mechanism of DMV formation. The formation of HCV DMV requires the knowledge of NS5A DMV. NS5A and Huh7 cells were introduced, NS5A and 11β-Hydroxy steroid dehydrogenase (HSD11) were detected. In addition, HSD11 was found to be important for the production of fat droplets. HSD11 is a multi-purpose device. One side, HSD13 and HSD11 are similar in structure, function and existence of liver cells. The relationship between HCV particle formation and HSD13 was investigated. SARS-CoV-2 infection in Vero cells and gut cells, RNA and DNA extraction, qRT-PCR, qPCR results, RNA and DNA detection, and increased RNA and DNA expression were observed. The analysis of COVID-19 infection in large intestine samples, the increase in RNA and DNA levels, and the possibility of SARS-CoV-2 reverse transcription are also discussed.

项目成果

NTCP Oligomerization Occurs Downstream of the NTCP-EGFR Interaction during Hepatitis B Virus Internalization

• DOI: 10.1128/jvi.00938-21
• 发表时间: 2021-12-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Fukano, Kento;Oshima, Mizuki;Muramatsu, Masamichi
• 通讯作者: Muramatsu, Masamichi

Induction of neutralizing antibodies against hepatitis C virus by a subviral particle-based DNA vaccine

• DOI: 10.1016/j.antiviral.2022.105266
• 发表时间: 2022-02-28
• 期刊: ANTIVIRAL RESEARCH
• 影响因子: 7.6
• 作者: Yato, Keigo;Matsuda, Mami;Suzuki, Ryosuke
• 通讯作者: Suzuki, Ryosuke

Hepatocellular organellar abnormalities following elimination of hepatitis C virus

• DOI: 10.1111/liv.15624
• 发表时间: 2023-06-13
• 期刊: LIVER INTERNATIONAL
• 影响因子: 6.7
• 作者: Aoyagi，Haruyo;Iijima，Hiroko;Aizaki，Hideki
• 通讯作者: Aizaki，Hideki

臨床消化器内科Vol.37 No.9

临床胃肠病学第37卷第9期

• 发表时间: 2022
• 作者: 相崎英樹;青柳東代;杉山真也;村松正道;溝上雅史;脇田隆字
• 通讯作者: 脇田隆字

新規の作用によりB型肝炎ウイルス感染を阻害する酸化ステロール合成誘導体の同定

鉴定具有新作用的抑制乙型肝炎病毒感染的氧化甾醇合成衍生物

• 发表时间: 2021
• 作者: 大嶋美月;深野顕人;岩本将士;Frank Stappenbeck;Feng Wang;鄭シン;山崎雅子;若江亨祥;相崎英樹;倉持幸司;村松正道;脇田隆字;Farhad Parhami;渡士幸一
• 通讯作者: 渡士幸一