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特発性肺線維症に対する脱分化脂肪細胞静脈内投与による治療効果の検討

静脉注射去分化脂肪细胞对特发性肺纤维化的治疗效果考察

基本信息

批准号：
21K08215
负责人：
風間智彦
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、難治性かつ治療法が乏しい特発性肺線維症（IPF）に対する脱分化脂肪細胞（DFAT）の治療効果を明らかにする目的で、肺線維症モデルマウスに対するDFAT静脈内投与による治療効果を検討するとともに、単球／マクロファージの可塑性に対するヒトDFATの影響を明らかにする。本年度において、C57BL/6マウスに対してブレオマイシン（BLM）を経気道投与して作製した肺線維症モデルに対するC57BL/6マウス由来DFAT（マウスDFAT）の至適投与細胞数ならびに投与間隔について検討した。検討した投与方法のうち、肺線維症モデル作製7日後に3×10の5乗個のマウスDFATを投与する方法を用いることで、細胞投与数日で死亡する個体を出すことなく、肺線維化の抑制効果を示すことができた。上記方法で細胞投与してから3週間後におけるマウス肺組織のHE染色結果ならびにヒドロキシプロリンアッセイによるコラーゲン定量化の結果より、陰性対照群である生理食塩水群と比較してマウスDFAT移植群において線維化領域の減少ならびにコラーゲン産生量が減少傾向にあり、肺線維化が抑制傾向にあることを明らかにした。さらに、肺線維化に係わる免疫細胞に対するDFATの作用を明らかにする目的で、様々な分化段階のマクロファージへ分化誘導したヒト単球由来細胞株（THP-1）とヒトDFATとの非接触型共培養を行なった。その結果、ヒトDFATとの共培養によりTHP-1由来M0マクロファージにおける炎症性サイトカインIL-1βならびにTNF-αのmRNA発現量が有意に低下した。また、ヒトDFATとの共培養によりTHP-1由来M2マクロファージにおける抗炎症性サイトカインIL-10のmRNA発現量が有意に上昇した。これらの結果より、DFATは肺線維化に係わる免疫細胞の抗炎症作用を増強させる効果を有すると推察した。

This study aims to clarify the therapeutic effects of refractory therapies on dedifferentiated adipocytes (DFAT) in idiopathic pulmonary fibrosis (IPF). This year, C57BL/6 was selected for the study of the optimal dose and cell count of DFAT (BLM) and the study of the optimal dose and dose interval. After 7 days of treatment, 3×10 and 5 ×10 cells were treated with DFAT and the method was used. After 7 days of treatment, cells were treated with DFAT and the results of lung maintenance inhibition were shown. 3 weeks after cell administration, HE staining results of lung tissue were quantified by the method described above. Comparison of physiological water intake groups with negative control groups showed a tendency to decrease in the area of linear maintenance and a tendency to decrease in the amount of pulmonary maintenance. To clarify the role of DFAT in the maintenance of human lung cells, a cell line derived from human lung cells (THP-1) was co-cultured with DFAT in a non-contact manner. As a result, co-culture with DFAT resulted in an intentional decrease in THP-1 mRNA production from M0, IL-1β and TNF-α. The mRNA expression of IL-10 in THP-1 derived from M2 was increased intentionally in co-culture with DAT. These results suggest that DFAT may enhance the anti-inflammatory effect of immune cells in lung maintenance.