進行性糖尿病性腎臓病の病態におけるシステイニルロイコトリエン受容体１の役割の解明

（目的）糖尿病腎の炎症の病態形成と腎病変の進展におけるシステイニル ロイコトリエン受容体1(CysLTR1)の果たす役割をCysLTR1拮抗薬プランルカストを用いて解明する。 （研究成果）実験1:Wistar fatty (WF)ラットに対するプランルカストの糖尿病性腎臓病の進展抑制効果の検証。36週齢雄のWFラットに8週間にわたり、プランルカスト3mg/kgあるい は対照液の投与（ゾンデにて投与）を行った。その結果、プランルカスト投与により、WFラットで認められる尿中L-FABP排泄量の増加、腎尿細管間質病変（炎症、線維化、尿細管細胞障害）、mTORの活性化及びオートファジーの低下、異常ミトコンドリアの尿細管細胞内における蓄積が軽減された。実験2: 培養ヒト近位尿細管細 胞(HK-2細胞)の高ブドウ糖によるオートファジーおよび炎症の変異に対するプランルカストの効果の検証。対照群(5mMブドウ糖含有培地に25mMマンニトールを添加）と比較して, 高ブ ドウ糖群(30mMグルコース含有培地)にて有意なp-AMPK発現の低下およびp-S6RP発現の増加を認めた（24時間培養後）。また、プランルカストは、1～50μMの附置にて、1～10 μMでは用量依存的に、10～50μMでは、ほぼ同等に、HG培養下において、p-AMPKの増加およびp-S6RP発現の低下、LC3-II発現の増加を認めた。プランルカストの細胞毒 性に関して、MTTアッセイおよびLDH releaseアッセイにて評価したところ、50μMでのみ細胞毒性を示した。また、HGにより誘導されるCysLTR1, p-S6RP発現の増加, p AMPK発現の低下は, プランルカスト10μMの附置にて、CysLT1R、p-S6RP発現は低下、p-AMPK発現は増加を認めた。LC3II発現は、プランルカストにより有意な増加を示した。 HGにより誘導される炎症性変異に関しては、p-NF-κB、NLRP3、IL-1β、TNF-α発現は、プランルカスト10μMの附置にて有意な低下を示した。

（目的）糖尿病腎の炎症の病態形成と腎病変の進展におけるシステイニル ロイコトリエン受容体1(CysLTR1)の果たす役割をCysLTR1拮抗薬プランルカストを用いて解明する。 （研究成果）実験1:Wistar fatty (WF)ラットに対するプランルカストの糖尿病性腎臓病の進展抑制効果の検証。36週齢雄のWFラットに8週間にわたり、プランルカスト3mg/kgあるい は対照液の投与（ゾンデにて投与）を行った。その結果、プランルカスト投与により、WFラットで認められる尿中L-FABP排泄量の増加、腎尿細管間質病変（炎症、線維化、尿細管細胞障害）、mTORの活性化及びオートファジーの低下、異常ミトコンドリアの尿細管細胞内における蓄積が軽減された。実験2: 培養ヒト近位尿細管細 胞(HK-2細胞)の高ブドウ糖によるオートファジーおよび炎症の変異に対するプランルカストの効果の検証。対照群(5mMブドウ糖含有培地に25mMマンニトールを添加）と比較して, 高ブ ドウ糖群(30mMグルコース含有培地)にて有意なp-AMPK発現の低下およびp-S6RP発現の増加を認めた（24時間培養後）。また、プランルカストは、1～50μMの附置にて、1～10 μMでは用量依存的に、10～50μMでは、ほぼ同等に、HG培養下において、p-AMPKの増加およびp-S6RP発現の低下、LC3-II発現の増加を認めた。プランルカストの細胞毒 性に関して、MTTアッセイおよびLDH releaseアッセイにて評価したところ、50μMでのみ細胞毒性を示した。また、HGにより誘導されるCysLTR1, p-S6RP発現の増加, p AMPK発現の低下は, プランルカスト10μMの附置にて、CysLT1R、p-S6RP発現は低下、p-AMPK発現は増加を認めた。LC3II発現は、プランルカストにより有意な増加を示した。 HGにより誘導される炎症性変異に関しては、p-NF-κB、NLRP3、IL-1β、TNF-α発現は、プランルカスト10μMの附置にて有意な低下を示した。