血中ctDNAを用いた小児甲状腺癌再発マーカーの開発

点击翻译按钮获取中文摘要

小児甲状腺癌および成人甲状腺癌の最初のマーカーとして末梢血のcirculating tumor DNAによるBRAF変異を測定することにより甲状腺癌早期再発のマーカーとしての有用性を模索した研究である。成人および小児の甲状腺癌の約７０％はBRAFV600Eの変異であり、これを末梢血中のcirculating tumor DNAから測定が可能になれば、早期再発のマーカーとしての有用性が高まる。令和４年度は甲状腺癌再発患者の末梢血中のcDNAのプライマー設計と検体収集を予定していたが、両研究者の学内での移動で、実際の研究遂行に支障が生じ、やや遅れを見せている。しかし、基礎実験等として、DNAの抽出、デジタルPCRの実験は継続し最終年度に目的が達成できるように準備中である。本年度の成果としては甲状腺癌患者のBFAFV600E変異の検出に関し１００例以上の症例で組織および細胞診から安定してできることを組織発現およびdirect sequence, デジタルPCR等で確認した。さらに細胞診LBC（液状検体）からのBRAF変異の検出も可能となった。しかし、再発巣が体表の穿刺可能な場所に限定されるので、末梢血でのcirculating tumor DNAでの検出が可能となればより早期の診断が可能となる。小児甲状腺癌では全摘でなく片葉切除が多く、全摘後の血液中のサイログロブリンでは再発のマーカーとはならず本検討が期待されるところである。今後も安定したDNA抽出技術とデジタルPCRなどの実験手法の教育と習熟に努め、BRAF転移陽性の乳頭癌患者の末梢血cDNA解析を行う本格実験開始に向けた準備ができた。