Clinical significance of oxidative stress-induced mitochondrial dysfunction in liver tissue of biliary atresia

氧化应激所致胆道闭锁肝组织线粒体功能障碍的临床意义

• 批准号: 21K08628
• 负责人: 岡崎 任晴
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08628/
• 关键词: 胆道閉鎖症; 自己肝生存; 肝内ミトコンドリア; ATP産生能; 酸化ストレス; 小児胆汁うっ滞疾患; 細胞内小器官; ミトコンドリア; ミトコンドリア機能; 肝線維症; ATP産生

本研究は、胆道閉鎖症患者および対照疾患患者の臨床肝検体を用いてミトコンドリア機能を軸に酸化ストレスの臨床意義を解明するものである。1)今年度も昨年度から引き続き、胆道閉鎖症肝組織におけるミトコンドリア機能・酸化ストレス因子と臨床パラメータの相関性を検討するため、胆道閉鎖症患者と胆道拡張症・他胆汁うっ滞疾患などのコントロール疾患症例から手術時・生検により肝組織を一部採取し、組織解析とmRNAの発現解析を進められるようにサンプルの準備を進めてきた。症例ごとに血液学的肝機能値・生命予後・自己肝生存などの臨床項目を調査した。2)過去検体も含めた組織免疫染色については、マトリックスマーカーのHsp60の発現分布を肝細胞内で定量化したところ、肝組織にダメージのない肝芽腫患者の正常肝組織や先天性胆道拡張症の肝組織と比して、胆道閉鎖症の肝組織内ではHsp60発現分布が低いこと、さらに胆道閉鎖症患者に限定しても肝移植となった予後不良な症例に比して、予後良好患者ではHsp60発現は高かった。すなわち、胆道閉鎖症の特に肝機能予後が不要な症例の手術時肝ではミトコンドリアのviabilityが損なわれていると考えられた。3)胆道閉鎖症特有にみられるミトコンドリア機能や酸化ストレス関連因子を網羅的に比較検討するためのバルクRNA-Seq解析を行った。非胆道閉鎖症肝のうち特に正常肝と比して、胆道閉鎖症肝ではミトコンドリアマトリックス関連分子群が大きく発現低下しているGO解析・pathway解析結果が得られた。また、解析結果をより強固なものとする準備として、胆道閉鎖症および対照症例肝組織からのmRNA抽出を継続した。

This study aims to clarify the clinical significance of the function of biliary tract acidification in patients with biliary atresia and in patients with biliary atresia. 1)This year, the correlation between biliary atresia liver tissue, biliary tract function, acidification factors and clinical symptoms was studied. Patients with biliary atresia, biliary tract tension, other biliary tract diseases, surgical procedures, and liver tissue samples were collected. Tissue analysis and mRNA expression analysis Case: Hematology, liver function, life expectancy, liver survival, clinical investigation 2)The distribution of Hsp60 in liver cells was quantified by immunostaining in the past. The distribution of Hsp60 in normal liver tissues of patients with hepatoma, congenital biliary tract dilatation and biliary atresia was low. The distribution of Hsp60 in liver tissues of patients with biliary atresia was limited. After a good patient, Hsp60 appears high. The liver function of biliary atresia is not affected by the operation. 3)Biliary atresia is a disease characterized by the expression of genes and the expression of genes. Non-biliary atresia livers are characterized by a large number of molecules associated with the presence of a lower proportion of normal livers than biliary atresia livers. Pathway analysis results are obtained. The results of the analysis are consistent with those of the preparation, biliary atresia, and mRNA extraction from liver tissues of patients.