同種異系iPS心筋細胞移植治療に対するiPS間葉系幹細胞を用いた免疫抑制法の開発
开发使用 iPS 间充质干细胞进行同种异体 iPS 心肌细胞移植治疗的免疫抑制方法
基本信息
- 批准号:21K08862
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
昨年度にiPS細胞からbFGF依存性分化誘導法によりiPS細胞由来間葉系幹細胞(iMSC)を作製し、典型的なMSCの細胞表面マーカー(CD73、CD90、CD105、CD29、CD44、CD146など)の発現、骨芽細胞・軟骨細胞・脂肪細胞の3系統への分化能を確認した。本年度はin vitroとin vivoでiMSCの免疫制御作用を検討した。in vitroでは、T細胞活性化と細胞傷害性を評価した。前者は、Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) で標識した健常人ドナー由来Tリンパ球を共刺激用抗体(抗CD3抗体および抗CD28抗体)で共刺激し、positive controlである骨髄由来間葉系幹細胞(BM-MSC)もしくはiMSCと混合比率を変えて培養した結果、BM-MSCと同様にiMSCの容量依存的にTリンパ球の増殖が抑制された。細胞傷害性は、NK細胞(Effector細胞)とCellTrace Violet染色したK562細胞(標的細胞)、BM-MSCもしくはiMSCを混合培養し、標的細胞の細胞死を評価した。BM-MSCと同様にiMSCはEffector細胞による標的細胞への細胞障害性を抑制した。In vivoでは、他家移植による免疫拒絶反応の抑制を評価した。ヒト末梢血単核球を投与してもgraft-versus host disease(GVHD)が起きにくいとされるMHC class I/II-deficient NOGマウス (NOG-dKO) を用いて免疫系ヒト化マウスを作製し、iPS細胞由来心筋細胞のみの皮下移植に比べてiMSCと同時移植により免疫拒絶反応が抑制され、移植片の生着が延長するかを検証する。現在、免疫系ヒト化マウスを作製するためにNOG-dKOへのPBMCの投与量、投与回数などを検討している。
Last year's iPS cells bFGF-dependent differentiation induction method iPS cells derived mesenchymal stem cells (iMSC) were produced, typical MSC cell surface cells ( CD73, CD90, CD105, CD29, CD44, CD146 ((CD73, CD90, CD105, CD29, CD44, CD146)) have been found, and the differentiation ability of 3 systems of osteoblasts, chondrocytes, and adipocytes has been confirmed. This year, the immune-controlling effects of iMSC have been studied both in vitro and in vivo. In vitro test, T cell activation and cell damage test were evaluated. The former, Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE), the logo, the origin of the common people's disease, the costimulatory antibody (anti-CD3 antibody, anti-CD28 antibody), the costimulatory antibody, positive controlであるBone-derived mesenchymal stem cells (BM-MSC)もしくはiMSCとmixing ratioを変えAs a result of culture, BM-MSC and iMSC are the same as iMSC, which inhibits the proliferation of T cells and inhibits their growth. Cell damage, NK cells (Effector cells), CellTrace Violet staining, K562 cells (target cells), BM-MSC, iMSC mixed culture, target cells, cell death, evaluation. BM-MSC and iMSC are the same as the effector cells and the target cells are the cells that inhibit the cytotoxicity. In vivo では, other transplant によるimmune rejection reaction suppression を価した.ヒトPeripheral blood mononuclear ball injection and graft-versus host disease (GVHD) がきにくいとされるMHC class I/II-deficient NOGマウス (NOG-dKO)をProduced by using the immune system ヒト化マウスを, iPS cells are derived from cardiac cells and are subcutaneously transplanted に比べてi Simultaneous transplantation of MSCs results in immune rejection and reaction suppression, and the prolongation of transplantation results in symptoms. Now, the immune system is made of ヒト化マウスをするためにNOG-dKOへのPBMCのinjection amount and number of times of administrationなどを検している.
项目成果
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专利数量(0)
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小田 紀子其他文献
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