同種異系iPS心筋細胞移植治療に対するiPS間葉系幹細胞を用いた免疫抑制法の開発

开发使用 iPS 间充质干细胞进行同种异体 iPS 心肌细胞移植治疗的免疫抑制方法

基本信息

  • 批准号:
    21K08862
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

昨年度にiPS細胞からbFGF依存性分化誘導法によりiPS細胞由来間葉系幹細胞(iMSC)を作製し、典型的なMSCの細胞表面マーカー(CD73、CD90、CD105、CD29、CD44、CD146など)の発現、骨芽細胞・軟骨細胞・脂肪細胞の3系統への分化能を確認した。本年度はin vitroとin vivoでiMSCの免疫制御作用を検討した。in vitroでは、T細胞活性化と細胞傷害性を評価した。前者は、Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) で標識した健常人ドナー由来Tリンパ球を共刺激用抗体(抗CD3抗体および抗CD28抗体)で共刺激し、positive controlである骨髄由来間葉系幹細胞(BM-MSC)もしくはiMSCと混合比率を変えて培養した結果、BM-MSCと同様にiMSCの容量依存的にTリンパ球の増殖が抑制された。細胞傷害性は、NK細胞(Effector細胞)とCellTrace Violet染色したK562細胞(標的細胞)、BM-MSCもしくはiMSCを混合培養し、標的細胞の細胞死を評価した。BM-MSCと同様にiMSCはEffector細胞による標的細胞への細胞障害性を抑制した。In vivoでは、他家移植による免疫拒絶反応の抑制を評価した。ヒト末梢血単核球を投与してもgraft-versus host disease(GVHD)が起きにくいとされるMHC class I/II-deficient NOGマウス (NOG-dKO) を用いて免疫系ヒト化マウスを作製し、iPS細胞由来心筋細胞のみの皮下移植に比べてiMSCと同時移植により免疫拒絶反応が抑制され、移植片の生着が延長するかを検証する。現在、免疫系ヒト化マウスを作製するためにNOG-dKOへのPBMCの投与量、投与回数などを検討している。
Last year にiPS cells ら bfGF-dependent differentiation induction method によ <s:1> iPS cells are derived from mesenchymal stem cells (iMSC) を for the production of カ, typical なMSC <s:1> cell surface <s:1> カ カ カ な (CD73, CD90, CD105, CD29, CD44, CD146な な) <s:1> occurrence, osteoblast · chondrocyte · adipocyte <e:1> The system へ <s:1> differentiating energy を confirms that た た. in the current year, を検 in vitroとin vivoでiMSC <s:1> immunomodular effects を検 for <s:1> た. in vitroで, T cell activation と cell harmfulness を evaluation 価 た. The former で, Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) で identification た healthy person ドナ ドナ origin Tリ <s:1> パ パ globule を co-stimulatory antibody (anti-CD3 antibody および anti-CD28 antibody) で co-stimulatory <s:1> positive Control で あ る leaf between bone marrow origin of stem cells (BM - MSC) も し く は iMSC と combined ratio を - え て cultivate し た results with others, the BM - MSC と に iMSC の capacity dependent に T リ ン パ ball の raised colonization が inhibit さ れ た. Cell injury-induced 価, NK cells (Effector cells) と cell trace Violet staining たK562 cells (target cells), BM-MSC く く iMSCを mixed culture <s:1>, target cells <s:1> cell death を evaluation 価 た た. BM-MSCと is similar to にiMSC に Effector cells による target cells へ <s:1> cell obstructive を inhibitory た た. In vivoで による, his family's transplantation による immunity rejection, anti-応 <s:1> inhibition を review 価 た た. Youdaoplaceholder0 peripheral blood 単 nucleus globules を with <s:1> て graft-versus host disease (GVHD) が <s:1> にく とされる とされる とされる とされるMHC class I/II-deficient NOG ウス (noG-dKO) を with い て immune system ヒ ト change マ ウ ス を cropping し heart muscle cells of the origins, iPS cells の み の に subcutaneous transplantation than べ て iMSC と and transplant に よ り immune refused to reverse 応 が inhibit さ れ, の stent with extended が す る か を 検 card す る. Now, the immune system ヒ ト change マ ウ ス を cropping す る た め に NOG - dKO へ の PBMC の and quantity, shots and the back number な ど を beg し 検 て い る.

项目成果

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