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肺胞上皮細胞シート移植による肺再生研究

肺泡上皮细胞片移植的肺再生研究

基本信息

批准号：
21K08913
负责人：
光星翔太
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08913/
关键词：
肺胞上皮細胞細胞シート移植肺再生フィーダーフリー

项目摘要

肺移植は現在の医療で他に有効な治療法がない疾患に必要とされ、本邦においても増加の一途である。しかしながら、ドナー不足が現状で、再生医療の果たす役割に大きな期待が寄せられている。肺胞上皮細胞（AEC；alveolar epithelial cell）はガス交換を担う重要な細胞だが、長期培養が困難とされてきた。AECの培養方法はマウス由来フィーダー細胞との共培養が確立されている。しかし、異種由来の細胞を使用し培養された細胞は、より安全性の担保が必要な再生医療には使用しづらい。現在までにフィーダーフリーでのAECの培養方法、AEC単一細胞からなるシート作製の報告はない。再生医療の組織補填療法として肺胞構造の再構築を目的に、AECを細胞ソースとし、フィーダーフリーでのAEC培養方法の確立とAECシート作製と再生治療としての移植を行う。ラットからAECを単離し、rhoキナーゼ阻害剤と組換えヒトラミニン511-E8タンパク質を用いて、フィーダーフリーでAECの培養を行い、細胞増殖を確認した。さらに、フィーダーフリーで培養されたAECは温度応答性培養皿を用いて細胞シート作製可能であった。培養細胞、作製された細胞シートは共に免疫染色でAECであることが確認された。作製されたAECシートを無胸腺ラットの肺切除断端へ移植し、1週間後に移植部位を摘出した。摘出した移植部位を免疫染色を行い、細胞シートがAECの特性を保持して生着していることを確認した。AECは継代によっても増殖を確認し、細胞シート作製が可能であった。

Lung transplantation is now a medical treatment for other diseases and needs, and the country has increased its efforts. The current situation of regenerative medicine is insufficient, and the results of regenerative medicine are expected. Pulmonary epithelial cells (AEC) are important cells for cell exchange, and long-term culture is difficult. AEC culture method is established by co-culture of AEC cells. The use of xenogeneic cells in culture is essential for ensuring safety in regenerative medicine. Now we have a report on AEC culture methods, AEC cell culture methods, and AEC cell culture methods. Regenerative medicine tissue replacement therapy and reconstruction of lung tissue, AEC cell culture method and establishment of AEC cell culture and regeneration therapy AEC isolation, rho resistance, cell culture, and cell culture were confirmed. The culture of AEC is temperature-sensitive and the production of cells is possible. Cultured cells, prepared cells, and immunostained cells were identified. The graft site was removed after 1 week of pneumonectomy. Explants the transplant site to carry on the immune staining, the cell to be able to maintain the AEC's characteristic AEC is the most effective way to control the proliferation of bacteria.