肺胞上皮細胞シート移植による肺再生研究

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肺移植は現在の医療で他に有効な治療法がない疾患に必要とされ、本邦においても増加の一途である。しかしながら、ドナー不足が現状で、再生医療の果たす役割に大きな期待が寄せられている。肺胞上皮細胞（AEC；alveolar epithelial cell）はガス交換を担う重要な細胞だが、長期培養が困難とされてきた。AECの培養方法はマウス由来フィーダー細胞との共培養が確立されている。しかし、異種由来の細胞を使用し培養された細胞は、より安全性の担保が必要な再生医療には使用しづらい。現在までにフィーダーフリーでのAECの培養方法、AEC単一細胞からなるシート作製の報告はない。再生医療の組織補填療法として肺胞構造の再構築を目的に、AECを細胞ソースとし、フィーダーフリーでのAEC培養方法の確立とAECシート作製と再生治療としての移植を行う。ラットからAECを単離し、rhoキナーゼ阻害剤と組換えヒトラミニン511-E8タンパク質を用いて、フィーダーフリーでAECの培養を行い、細胞増殖を確認した。さらに、フィーダーフリーで培養されたAECは温度応答性培養皿を用いて細胞シート作製可能であった。培養細胞、作製された細胞シートは共に免疫染色でAECであることが確認された。作製されたAECシートを無胸腺ラットの肺切除断端へ移植し、1週間後に移植部位を摘出した。摘出した移植部位を免疫染色を行い、細胞シートがAECの特性を保持して生着していることを確認した。AECは継代によっても増殖を確認し、細胞シート作製が可能であった。