ヒト破骨細胞分化を評価するための新規共存培養系の開発

开发一种新型共培养系统来评估人类破骨细胞分化

• 批准号: 21K09284
• 负责人: 佐藤 浩二郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09284/
• 关键词: 破骨細胞; 樹状細胞; M-CSF; GM-CSF; IL-4

ヒト末梢血由来の単核球からAutoMACSを用いて古典的単球(classical monocytes)を調整し、M-CSF存在下で培養することにより破骨細胞前駆細胞を得ることができる。それをM-CSF + RANKL存在下で培養すると破骨細胞（TRAP染色陽性多核細胞）が得られる。この細胞は骨吸収活性評価プレート上で培養することにより骨吸収能を示した。マウス由来の細胞と同様、IFN-γやIL-4存在下でこの破骨細胞分化は強く抑制された。TNF存在下でも破骨細胞分化は抑制されたが、同濃度ではIFN-γやIL-4に比べその抑制は弱かった。本研究の目的は、関節リウマチで骨破壊に寄与するような炎症性の破骨細胞の培養条件を見いだすことである。そこで従来から頻用されてきた(1) M-CSFの他に、近年報告された(2) GM-CSF + IL-4存在下で培養した細胞、また(3) GM-CSFと他の因子の存在下で培養した細胞などを前駆細胞として利用した。(1)-(3)いずれもM-CSF + RANKL刺激下で培養するとTRAP染色陽性多核細胞となり、骨吸収活性評価プレートにより骨吸収能を示した。ただし(2)の条件においてはM-CSF + RANKLの環境に移す前にM-CSF単独の存在下で培養することが必要であった。またこの細胞はTNFが低濃度であっても存在すると細胞数が減少し、多核細胞が分化しないことが明らかとなった。このことから、IL-4により誘導される前駆細胞が炎症性破骨細胞に分化するためには、前駆細胞の分化環境と破骨細胞の文化環境が完全に独立している必要があることが示唆される。

AutoMACS was used to regulate the origin of peripheral blood mononuclear cells and classical mononuclear cells. Osteoclast precursor cells were cultured in the presence of M-CSF. Osteoclasts (TRAP-positive multinucleated cells) were cultured in the presence of M-CSF + RANKL. These cells were evaluated for bone uptake activity and cultured to demonstrate bone uptake activity. In the presence of IFN-γ and IL-4, osteoclast differentiation was strongly inhibited. TNF inhibited osteoclast differentiation, but IFN-γ and IL-4 inhibited osteoclast differentiation at the same concentration. The purpose of this study was to investigate the culture conditions of inflammatory osteoclasts in vitro. In recent years, cell culture in the presence of GM-CSF + IL-4, cell culture in the presence of GM-CSF + IL-4, and cell culture in the presence of GM-CSF and other factors have been reported. (1)-(3) The TRAP-positive multinucleated cells cultured under M-CSF + RANKL stimulation were evaluated for bone resorption activity and bone resorption activity. Under the conditions of (2), it is necessary to culture in the presence of M-CSF alone before the environment of M-CSF + RANKL is transferred. The number of cells decreased due to the presence of TNF at low concentrations, and the differentiation of multinucleated cells increased. IL-4 induces osteoclasts to differentiate into inflammatory osteoclasts in an environment that is completely independent of the osteoclast culture.

项目成果

関節リウマチ治療実践バイブル III章６項

类风湿性关节炎治疗实践圣经第三章第 6 节

• 发表时间: 2022
• 作者: Nakamoto Hideki;Katanosaka Yuki;Chijimatsu Ryota;Mori Daisuke;Xuan Fengjun;Yano Fumiko;Omata Yasunori;Maenohara Yuji;Murahashi Yasutaka;Kawaguchi Kohei;Yamagami Ryota;Inui Hiroshi;Taketomi Shuji;Taniguchi Yuki;Kanagawa Motoi;Naruse Keiji;Tanaka Sakae;Sait;竹内勤編集
• 通讯作者: 竹内勤編集

Epstein-Barr virus encephalitis in a patient with rheumatoid arthritis

类风湿性关节炎患者的 Epstein-Barr 病毒脑炎

• DOI: 10.1093/mrcr/rxab045
• 发表时间: 2022
• 期刊: Modern Rheumatology Case Reports
• 影响因子: 0.8
• 作者: Nakamura Jun;Yanagida Mai;Saito Keisuke;Kamata Yasuyuki;Nagashima Takao;Iwamoto Masahiro;Sato Takeo;Sato Kojiro
• 通讯作者: Sato Kojiro

自治医科大学内科学講座 アレルギー膠原病学部門

自治医科大学内科、过敏与胶原病科

抗MDA-5抗体陽性皮膚筋炎におけるIP-10産生細胞についての検討

抗MDA-5抗体阳性皮肌炎中IP-10产生细胞的研究

• 发表时间: 2023
• 作者: Kitamura K;Fujii M;Iwamoto Y;Yamaguchi R;Kawahara S;Ikemura S;Hamai S;Motomura G;Nakashima Y;石澤 彩子
• 通讯作者: 石澤 彩子

自治医科大学内科学講座アレルギー膠原病学部門

济济医科大学内科过敏与胶原病科