Investigation of the molecular mechanism mediating the resistance to combined treatment with IO drug and TKI in renal cell carcinoma and the development of the novel therapy targeting this mechanism

肾细胞癌IO药物与TKI联合治疗耐药的分子机制研究及针对该机制的新疗法的开发

• 批准号: 21K09341
• 负责人: 三宅 秀明
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09341/
• 关键词: 腎細胞癌; I0 drug; TKI; 耐性獲得機構; 新規治療; IO drug

令和４年度における本研究は、令和３年度の研究成果を基に順調に推移した。マウス腎癌細胞株RenCaを用いて確立したIO-TKI comb Tx（マウス抗PD-1抗体+アキシチニブ、マウス抗PD-L1抗体+アキシチニブ）に対する耐性を獲得したin vivo腫瘍モデルを用いて、IO-TKI comb Tx抵抗性腫瘍および母細胞株由来腫瘍を、同系マウスで増殖させ、無治療あるいはIO-TKI comb Tx施行直後に採取した腫瘍の計4種類の腫瘍組織を対象に、アポトーシス、EMTおよび免疫（免疫チェックポイント関連分子、抑制系免疫調整因子および抗原提示分子等）関連分子の発現レベルをWestern blotting、免疫組織化学染色等により評価した結果、IO-TKI comb Tx抵抗性腫瘍で高発現し、かつIO-TKI comb Tx施行後もその発現レベルが維持されている複数の分子を同定した。さらに、cDNA microarrayを用いて上記4種類の腫瘍組織の遺伝に発現レベルを網羅的に解析した結果、上記解析にて同定された分子と同様のプロファイルを有する遺伝子を複数同定した。現在、これらの解析にて同定された複数の遺伝子の中から、治療標的として活性阻害を行う対象としての候補遺伝子の選定を行っているところである。また、上記4種類の腫瘍組織におけるチロシンキナーゼ活性を有する種々の受容体蛋白のリン酸化をRTK Phosphorylation Antibody Arrayを用いて評価を並行して実施している。

The research results of this study in the fourth year and the third year are based on sequential progress. Renal cell carcinoma cell line IO-TKI comb Tx Anti-PD-1 antibody + anti-PD-L1 antibody + anti-PD Western blotting and immunohistochemical staining were used to evaluate the results of detection of anti-tumor, EMT and immune (immune related molecules, inhibitory immune regulatory factors, antigen indicating molecules, etc.) related molecules. IO-TKI comb Tx resistant tumors were highly detected, and the detection of anti-tumor after IO-TKI comb Tx administration was maintained. In addition, cDNA microarray was used to identify the four types of tumor tissue gene. The results of analysis and identification of the four types of tumor tissue gene were as follows: Now, the analysis of the same set of multiple vectors, the treatment target, the active resistance, the selection of candidate vectors, the selection of the same set of vectors, and the selection of candidate vectors. The above four types of tumor tissue have been evaluated for their activity and activity.