腎細胞がん微小環境におけるCD8陽性T細胞と癌線維芽細胞の相互作用の病態解明

我々はこれまでに腎細胞癌の同所移植モデルマウスを用いて、骨髄由来幹細胞の一部が同所移植にて作製した腎細胞癌の間質にて癌関連線維芽細胞に分化することを証明している。本研究では癌関連線維芽細胞とCD8陽性T細胞が腎細胞癌微小環境にてどのような挙動を示すかを明らかにすることを目的としている。そのため癌関連線維芽細胞単体が腎癌細胞にどのような影響を及ぼすか明らかにするために、腎癌細胞株の細胞増殖と遊走能への影響を検証する事で確認した。まずは、ヒト骨髄由来幹細胞と転移性腎細胞癌株のCaki-1を用いて共培養し、細胞増殖と遊走能を確認した。同実験にてIncuCyteのTime-lapse Imagingを用いて、細胞増殖能と細胞遊走能を数値化して検証するだけではなく、可視化して検証した。まず骨髄由来幹細胞を培養したCondition Medium(CM)でCaki-1を培養したグループとCaki-1と骨髄由来幹細胞を直接接触させて共培養したグループでは、直接培養したグループにて有意に細胞増殖が増加した(p=0.0169)。また同様の2グループで遊走能を検証したが、Caki-1と骨髄由来幹細胞を直接培養したグループでは有意に遊走能が上昇した。骨髄由来幹細胞はPKHで標識していたため、Time-lapse imagingではスクラッチした培地に、骨髄由来幹細胞に先導されてCaki-1が遊走されることが明らかになった。

我々はこれまでに腎細胞癌の同所移植モデルマウスを用いて、骨髄由来幹細胞の一部が同所移植にて作製した腎細胞癌の間質にて癌関連線維芽細胞に分化することを証明している。本研究では癌関連線維芽細胞とCD8陽性T細胞が腎細胞癌微小環境にてどのような挙動を示すかを明らかにすることを目的としている。そのため癌関連線維芽細胞単体が腎癌細胞にどのような影響を及ぼすか明らかにするために、腎癌細胞株の細胞増殖と遊走能への影響を検証する事で確認した。まずは、ヒト骨髄由来幹細胞と転移性腎細胞癌株のCaki-1を用いて共培養し、細胞増殖と遊走能を確認した。同実験にてIncuCyteのTime-lapse Imagingを用いて、細胞増殖能と細胞遊走能を数値化して検証するだけではなく、可視化して検証した。まず骨髄由来幹細胞を培養したCondition Medium(CM)でCaki-1を培養したグループとCaki-1と骨髄由来幹細胞を直接接触させて共培養したグループでは、直接培養したグループにて有意に細胞増殖が増加した(p=0.0169)。また同様の2グループで遊走能を検証したが、Caki-1と骨髄由来幹細胞を直接培養したグループでは有意に遊走能が上昇した。骨髄由来幹細胞はPKHで標識していたため、Time-lapse imagingではスクラッチした培地に、骨髄由来幹細胞に先導されてCaki-1が遊走されることが明らかになった。