マウス基底膜ライブイメージングによる網膜血管の形成機構とその病的変化の可視化

利用小鼠基底膜实时成像可视化视网膜血管的形成机制及其病理变化

• 批准号: 21K09732
• 负责人: 二木 杉子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09732/
• 关键词: 基底膜; ライブイメージング

本研究は血管の形成や機能に重要な役割を果たす基底膜の形成維持機構や動的変化を明らかにすることを目的としており、基底膜イメージングモデルマウスNid1-mCherryを用いて生体内（生組織）での基底膜のライブイメージングによる解析をおこなっている。2022年度は、Nid1-mCherryマウスの網膜血管基底膜を器官培養下で継続的に観察し、レーザー光照射による基底膜蛍光の褪色と回復を定量的に測定した。基底膜蛍光はレーザー照射によって照射前の20%以下まで褪色し、12-16時間培養後には60-80%程度まで回復した。照射後の網膜を培養下でタイムラプス撮影することにより、蛍光回復の経過を詳細に解析した。蛍光の回復率は時間経過に対して一定ではなく、照射直後に最も回復が早く、次第に回復率が低下しながら8時間以上にわたって回復が続くことが明らかとなった。またこれらの回復率の変化は、網膜あたりの複数の観察箇所で一定の再現性があり、異なるマウス個体由来の網膜でも同様の傾向が見られた。この結果は2023年度に論文として発表した（Futaki et al., Matrix Biol Plus）。同時に、Nid1-mCherryが基底膜に組み込まれる機構についての新たな考察と問題提起も行なった。本解析で見られた基底膜蛍光の回復は、基底膜構成因子の生理的なターンオーバーを示唆している。そのメカニズムを明らかにするため、網膜組織培養下で阻害剤などを添加した場合の蛍光回復率の変化についての解析を継続して進めている。

In this study, the angiogenesis mechanism plays an important role in the formation and maintenance of the basement membrane. The purpose of this study is to determine the mechanism of the formation and maintenance of the basement membrane. in this study, the angiogenesis mechanism plays an important role in the formation and maintenance of the basement membrane. in this study, the angiogenesis mechanism plays an important role in the formation of the basement membrane, the formation and maintenance of the basement membrane. In the year 2022, Nid1-mCherry was used to determine the quantitative measurement of the color fading of the basement membrane under the tissue culture of the vascular basement membrane. The base membrane was exposed to light and light. The temperature was less than 20% before irradiation, and 60-80% after 12-16 time incubation. After irradiation, the network film is used to analyze the image after irradiation. When the light return rate is over time, the light response rate must be good after exposure, the last return time is early after exposure, and the second return rate is low. After more than 8 hours, the response rate is over 8 hours. The response rate is different, the network network is complex, and the source of the network is the same as that of the network. The results show that in 2023, there is a general table (Futaki et al., Matrix Biol Plus). At the same time, the Nid1-mCherry basement membrane organization will conduct a review on the issue of the new review. The purpose of this analysis is to analyze the physiological characteristics of the basement membrane, the light and the factors of the basement membrane. You need to know how to do this, and how to add the optical return rate under the network tissue culture to improve the performance.

项目成果

Kinetics of fluorescence-taggled Nidogen-1 accumulation on the retinal vascular basement membrane

荧光标记的 Nidogen-1 在视网膜血管基底膜上积累的动力学

• 发表时间: 2022
• 作者: Sugiko Futaki;Kiyotoshi Sekiguchi;Yoichi Kondo
• 通讯作者: Yoichi Kondo

基底膜イメージングモデルマウスを用いた網膜血管基底膜のライブ観察

利用基底膜成像模型小鼠实时观察视网膜血管基底膜

• 发表时间: 2022
• 作者: 二木杉子;関口清俊;近藤洋一
• 通讯作者: 近藤洋一

Dynamics, structure and assembly of the basement membrane in developing salivary glands revealed by an exogenous EGFP-tagged nidogen probe

外源性 EGFP 标记巢探针揭示唾液腺发育中基底膜的动力学、结构和组装

• DOI: 10.1093/jmicro/dfac040
• 发表时间: 2022
• 期刊: Microscopy
• 影响因子: 1.8
• 作者: Kadoya Yuichi;Futaki Sugiko;Shimono Chisei;Kimura Taketoshi;Sekiguchi Kiyotoshi
• 通讯作者: Sekiguchi Kiyotoshi